1樓：匿名使用者
pcr是指聚合酶鏈式反應，是dna擴增的一種方法，實驗中很常用。包括高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應。標準的pcr過程分為三步：
變性（90℃-96℃）：雙鏈dna模板在熱作用下，氫鍵斷裂，形成單鏈dna。
2.退火（復性）（25℃-65℃）：系統溫度降低，引物與dna模板結合，形成區域性雙鏈。
3.延伸（68℃-75℃）：在taq酶（在72℃左右最佳的活性）的作用下，以dntp為原料，從引物的5′端→3′ 端延伸，合成與模板互補的dna鏈。
pcr延伸時間是不是和擴增片段大小有關
2樓：當代教育科技知識庫
有關。並不大，應該不難。
pcr延伸時間上，實驗室一般用95℃/30秒變性，55℃/45秒退火，用的是95℃/20秒變性，55℃/30秒退火。上面說的是常用的條件，如果擴增不出來就降低退火溫度，特異性不高就提高退火溫度，一般都能做出來的。
3樓：匿名使用者
普通的pcr只要根據酶的說明書來設定反應時間就可以了，一般taq酶每分鐘延伸1kb，甲基化pcr是在做pcr之前，將模板dna做甲基化修飾，pcr反應及電泳步驟都是一樣的！我在分子生物學書上看到：延伸時間與產物片段長度有關，產物在1kb以內的延伸時間為1分鐘左右，3kb-4kb的需延伸3-4分鐘。
我的熱啟動taq酶說明書上舉例的pcr反應條件是：94度30s,55度30s,72度1min,72度5min,前三個一起35個迴圈。
pcr擴增最重要的步驟是什麼?
4樓：匿名使用者
首先就是設計好引物唄，引物錯了後面都對了也沒用~~
5樓：匿名使用者
與退火溫度悉悉相關的引物設計，主要是長度。
6樓：士誠小人也
都挺重要。
非要說最重要，那隻能是退火了。
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