蛋白質沉澱試驗 鹽析問題

時間 2023-03-03 18:05:13

1樓:樊天驕剛陣

你前面說的沒有錯,在少量的情況下,應該加飽和溶液比較好。

但是加固體和加液體其實是一樣的。

只是在固體是相對於液體來說是減少了體積,增大了濃度。

這樣說很抽象,我來打個比方。

考慮蛋白質溶液的量很小,飽和的硫酸銨溶液加進去,硫酸銨溶液的質量分數只是減少了一點點。

而加入固體時,由於溫度不變時,硫酸鈉的溶解度是一定的。所以加入的硫酸鈉固體最後是變成了飽和溶液和無法繼續溶解的固體。

而你加飽和溶液時不用擔心ph問題,而加固體時只是比飽和溶液的ph值略大那麼一點點,甚至可以忽略不計的時候,你說會對酶液產生影響嗎?

用固體好處在於液體的體積幾乎沒有變化,蛋白質溶液的體積不變,那單位體積可溶的蛋白質也不變,而又由於硫酸銨的存在,溶解度減少而析出。

加液體則增加了溶液的體積。這樣雖然有硫酸銨的存在,但是由於溶質不變,而溶劑增加,不可避免的在該溶液中,使得蛋白質的可溶質量變大。

有些抽象,如不能理解,也只能怪我嘴太笨了,半天扯不出個一二三來。

2樓:鎮胤伊知

加固體肯定會對ph有影響,就是讓蛋白質變性了才能析出啊,然後在復性啊,不用擔心的。

鹽析法沉澱蛋白質的原理

3樓:安紫玥

鹽析法沉澱蛋白質的原理是:由於向蛋白質溶液中加入了大量的鹽,如硫酸銨、氯化鈉等,因此使得蛋白質表面的電荷被中和,破壞了其表面的水化膜,於是達到蛋白質沉澱的效果。

蛋白質的基本單位是氨基酸,氨基酸脫水縮合後連成肽鏈,而蛋白質就是由一條或多條多肽鏈組成的生物大分子。其分子表面多為親水基團,可吸引水分子使其表面形成一層水化膜,抑制顆粒的相互聚集,其表面還帶有電荷,使顆粒間互斥不易聚成團,防止蛋白質沉澱析出。

鹽析法得到的蛋白質如何脫鹽

4樓:絕技壞

常用的是凝膠過濾層析脫鹽,利用具有網狀結構的凝膠的分子篩作用,根據被分離物質的分子大小不同來進行分離。

蛋白質溶液中鹽分子和蛋白質分子大小相差較大,鹽分子較小,會隨著層析流動相進入孔徑較小的固定相,在層析中遷移速率小,而蛋白質分子尺寸較大,不能隨流動相進入固定相,遷移速率大,首先從層析術中流出,實現脫鹽。

5樓:匿名使用者

最常用的脫鹽方法是透析法,如圖2-1所示:把蛋白質溶液裝入透析袋中,袋的二端用線紮緊,然後用蒸餾水或緩衝液進行透析,這時鹽離子通過透析袋擴散到水或緩衝液中,蛋白質分子量大不能穿透析袋而保留在袋內,通過不斷更換蒸餾水或緩衝液,直至袋內鹽分透析完畢。透析需要較長時間,常在低溫下進行,並加入防腐劑避免蛋白質和酶的變性或微生物的汙染。

6樓:胚胎師媽媽

梯度透析,透析液從高鹽分到低鹽分,這樣就能使蛋白質中的鹽分降低了。

蛋白質的鹽析需要的實驗儀器和藥品

7樓:印蘭英奈燕

蛋白質鹽析一般是指溶液中加入無機鹽類。

(輕金屬鹽,如nacl,(nh4)2so4等)而使蛋白質。

溶解度降低而析出的過程。

8樓:慕容曼華聊雁

超級簡單……主要看你怎麼做。

常見的實驗流程是往蛋白質溶液里加入鹽的固體或者飽和鹽溶液,振盪觀察有無蛋白質沉澱析出。

實驗儀器:燒杯(裝蛋白質溶液,用其他功能類似的東西也行,比如錐形瓶或者試管)。如果用飽和鹽溶液需要一個滴瓶或者細口瓶來裝鹽溶液,需要量筒來計量;如果是鹽固體需要藥匙來取鹽。

藥品:蛋白質溶液,中性鹽。這個鹽具體起來可以是硫酸銨,氯化鈉或者氯化銨硫酸鈉什麼的,有很多種。

--順便,樓下答案是胡扯。專業術語裡沒有「變質」這種說法。

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