蛋白質的兩性解離中顏色及沉澱變化的原因是什麼拜託各位了3Q

時間 2021-06-05 21:08:33

1樓:儲雅惠

實驗:蛋白質兩性性質及等電點的測定 目的要求 (1)瞭解蛋白質的兩性性質。 (2)掌握通過聚沉測定蛋白質等電點的方法。

實驗原理 蛋白質是兩性電解質。蛋白質分子中可以解離的基團除n端α―氨基與c端α―羧基外,還有肽鏈上某些氨基酸殘基的側鏈基團,如酚基、巰基、胍基、咪唑基等基團,它們都能解離為帶電基團。因此,在蛋白質溶液中存在著下列平衡:

陽離子兩性離子陰離子 ph < piph = piph > pi 電場中:移向陰極不移動移向陽極調節溶液的ph使蛋白質分子的酸性解離與鹼性解離相等,即所帶正負電荷相等,淨電荷為零,此時溶液的ph值稱為蛋白質的等電點。在等電點時,蛋白質溶解度最小,溶液的混濁度最大,配製不同ph的緩衝液,觀察蛋白質在這些緩衝液中的溶解情況即可確定蛋白質的等電點。

試劑和器材 一、試劑 1mol/l乙酸:吸取99.5%乙酸(比重1.

05)2.875ml,加水至50ml。 0.

1mol/l乙酸:吸取1mol/l乙酸5ml,加水至50ml。 0.

01mol/l乙酸:吸取0.1mol/l乙酸5ml,加水至50ml。

0.2mol/l naoh:稱取naoh2.

000g,加水至50ml,配成1mol/l naoh。然後量取1mol/l naoh 10ml,加水至50ml, 配成0.2mol/l naoh。

0.2mol/l hcl:吸取37.

2%(比重1.19)hcl 4.17ml,加水至50ml,配成1mol/l hcl。

然後吸取1mol/l hcl 10ml,加水至50ml,配成0.2mol/l hcl。 0.

01%溴甲酚綠指示劑:稱取溴甲酚綠0.005g,加0.

29ml 1mol/l naoh,然後加水至50ml。 二、測試樣品 0.5%酪蛋白溶液:

稱取酪蛋白(乾酪素)0.25g放入50ml容量瓶中,加入約20ml水,再準確加入1mol/l naoh 5ml,當酪蛋白溶解後,準確加入1mol/l乙酸5ml,最後加水稀釋定容至50ml,充分搖勻。 三、器材 試管1.

5×15cm(×8);移液管1ml(×4),2ml(×4),10ml(×2);膠頭滴管(×2)。 操作方法 一、蛋白質的兩性反應 (1)取一支試管,加0.5%酪蛋白1ml,再加溴甲酚綠指示劑4滴,搖勻。

此時溶液呈藍色,無沉澱生成。 (2)用膠頭滴管慢慢加入0.2mol/l hcl,邊加邊搖知道有大量的沉澱生成。

此時溶液的ph值接近酪蛋白的等電點。觀察溶液顏色的變化。 (3)繼續滴加0.

2mol/l hcl,沉澱會逐漸減少以至消失。觀察此時溶液顏色的變化。 (4)滴加0.

2mol/l naoh 進行中和,沉澱又出現。繼續滴加0.2mol/l naoh,沉澱又逐漸消失。

觀察溶液顏色的變化。 二、酪蛋白等電點的測定 (1)取同樣規格的試管7支,按下表精確地加入下列試劑: 試劑(ml) 管號 1 2 3 4 5 6 7 1.

0mol/l 乙酸 1.6 0.8 0 0 0 0 0 0.

1mol/l 乙酸 0 0 4 1 0 0 0 0.01mol/l 乙酸 0 0 0 0 2.5 1.

25 0.62 h2o 2.4 3.

2 0 3 1.5 2.75 3.

38 溶液的ph 3.5 3.8 4.

1 4.7 5.3 5.

6 5.9 混濁度 (2)充分搖勻,然後向以上各試管依次加入0.5%酪蛋白1ml,邊加邊搖,搖勻後靜置5min,觀察各管的混濁度。

(3)用-、+、++、+++等符號表示各管的混濁度。根據混濁度判斷酪蛋白的等電點。最混濁的一管的ph值即為酪蛋白的等電點。

注意事項 在測定等電點的實驗中,要求各種試劑的濃度和加入量相當準確。 參考資料:http:

//biochem.sjtu.edu.

cn/experiment9.htm

2樓:小宇宙

蛋白質分子中含有多個可解離的酸性或鹼性基團 (酸性基團主要是c末端羧基及酸性氨基酸側鏈的羧基,鹼 性基團有n末端的氨基及鹼性氨基酸側鏈的氨基、胍基及咪基)。 原理: 蛋白質由氨基酸組成。

蛋白質分子除兩端遊離的氨基和羧基可解離外,其側鏈上的某些酸性基團或鹼性基團,在一定的溶液ph條件下,都可解離成帶負電荷或帶正電荷的基團。因此,蛋白質具有兩性解離性質。當蛋白質溶液處於某一ph時,蛋白質解離成陽離子和陰離子的趨勢相等,既淨電荷為零,成為兼性離子,此時溶液的ph稱為蛋白質的等電點(isoelectric point,pi)。

蛋白質在等電點狀態時溶解度最低,容易沉澱析出。蛋白質在大於其等電點的ph值溶液中帶負電荷;在小於其等電點的ph值溶液中則帶正電荷。蛋白質在等點電以外的ph值溶液中,因分子帶有同種電荷而相互排斥,不易沉澱。

本實驗通過觀察酪蛋白在不同ph溶液中的溶解度來測定其等電點。 蛋白質解離成陽離子 蛋白質成兼性離子 蛋白質解離成陰離子

3樓:匿名使用者

蛋白質變性會發生顏色變化。羧基和羥基是產生沉澱的主要原因!

生物化學實驗:蛋白質的兩性反應和等電點測定 以下3個問題急求答案~ 求求各位大俠相助啊!

4樓:匿名使用者

1.當蛋白質溶來液處於某一ph時,源蛋白質解離bai成正、負離子的趨勢du相等,即成為兼zhi

性離子,淨電荷dao為零,此時溶液的ph稱為蛋白質的等電點。在等電點時蛋白質的溶解度最小,在電場中不移動。

在pi時,蛋白質失去了膠體的穩定條件,即沒有相同電荷相互排斥的作用。所以不穩定,溶解度最小,易沉澱。

其他的不清楚

5樓:

當溶液為某一ph值時,氨基酸分子中所含的-nh3+和-coo-數目相等,淨電荷為0。這一ph值即為氨基酸的等電點,簡稱pi。在等電點時,氨基酸既不向正極也不向負極移動,即氨基酸處於兩性離子狀態。

蛋白質與蛋白質粉的區別,蛋白粉和蛋白質粉的差別?

蛋白質是蛋白質,而蛋白質粉 只限於紐崔萊 是指8 9種必須氨基酸的粉狀產品。蛋白質促進胃酸分泌,是指需要胃酸把蛋白質分解消化成氨基酸才能吸收,所以才促進胃酸分泌。而蛋白質粉是直接可以被人體吸收的氨基酸,所以不需要消化的過程,故沒有你所擔心的問題。蛋白質是任何生物細胞組成的物質基礎,我們常吃的雞蛋 大...

蛋白質與核酸區別,蛋白質與核酸的區別

核酸和蛋白質是生物體中最重要的有機物 核酸是遺傳資訊的載體,是一切生物的遺傳物質,對生物的遺傳變異和蛋白質的合成有極其重要的作用 而蛋白質是一切生命活動的體現者,它不僅是構成細胞和生物體的重要物質,也是調節細胞和生物體新陳代謝的重要物質 核酸與蛋白質有著明顯的區別,電有密切的聯絡 蛋白質變性是指高階...

生物蛋白質的元素為什麼是,生物蛋白質的元素為什麼是c,h,o,n,s

1 構成蛋白質的基本單位是氨基酸,其結構通式是 即每種氨基酸分子至少都含有一個氨基和一個羧基,且都有一個氨基和一個羧基連線在同一個碳原子上,這個碳原子還連線一個氫和一個r基,氨基酸的不同在於r基的不同 2 氨基酸通過脫水縮合形成多肽鏈,而脫水縮合是指一個氨基酸分子的羧基和另一個氨基酸分子的氨基相連線...