1樓:匿名使用者
你是想問氯化鈣法制作感受態細胞麼
cacl2法
1.將快速生長的大腸桿菌置於經低溫(0℃)預處理的低滲氯化鈣溶液中,便會造成細胞膨脹,同時ca2+會使細胞膜磷脂雙分子層形成液晶結構,促使細胞外膜與內膜間隙中的部分核酸酶解離開來,離開所在區域,誘導細胞成為感受態細胞
細胞膜通透性發生變化,極易與外源dna相粘附並在細胞表面形成抗脫氧核糖核酸酶的羥基-磷酸鈣複合物。
2.此時,將該體系轉移到42℃下做短暫的熱刺激(90s),細胞膜的液晶結構會發生劇烈擾動,並隨機出現許多間隙,外源dna就可能被細胞吸收。進入細胞的外源dna分子通過複製、表達,實現遺傳資訊的轉移,使受體細胞出現新的遺傳性狀。
3.將轉化後的細胞在選擇性培養基上培養,篩選出帶有外源dna分子的陽性克隆。
2樓:匿名使用者
鈣離子和要轉化的基因結合會形成抗內切酶的羥基-磷酸鈣複合物,粘附在細菌細胞表面,當熱激時,細胞膜的液晶結構會發生劇烈擾動,產生裂縫,使基因被轉化進入胞內
3樓:匿名使用者
增大細胞膜的通透性,使之成為感態細胞
4樓:匿名使用者
也可以用電擊轉化、原生質體融合
5樓:
因為微生物實在太小,不可能使用顯微注射法注入dna,只能讓它自行吸收dna,但正常狀態下微生物不會自行吸收dna,所以需要刺激它來讓它吸收dna,經過科學家無數次的實驗,目前發現只有鈣鹽溶液可以讓微生物變為感受態細胞,你想問為什麼只能用氯化鈣是因為目前沒發現其他的試劑可以做到相同的效果,並且動植物細胞由於進化太多,已經不可能再變為感受態(也可能是人類技術達不到讓動植物細胞變為感受態),所以目前只有氯化鈣而且只能處理微生物細胞
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