植物轉化原理與方法,植物dna提取的原理和方法?其中乙醇和氯仿一異成醇各起什麼作用

時間 2021-08-30 09:29:33

1樓:匿名使用者

你應該說的是植物三種不同的基因轉化方法吧!

農桿菌介導基因轉化:

轉化原理:農桿菌是普遍存在於土壤中的一種革蘭氏陰性細菌,它能在自然條件下趨化性地感染大多數雙子葉植物的受傷部位,並誘導產生冠癭瘤或髮狀根。根癌農桿菌和髮根農桿菌中細胞中分別含有ti質粒和ri質粒,其上有一段t-dna,農桿菌通過侵染植物傷口進入細胞後,可將t-dna插入到植物基因組中,並且可以通過減速**穩定的遺傳給後代,這一特性成為農桿菌介導法植物轉基因的理論基礎。

人們將目的基因插入到經過改造的t-dna區,藉助農桿菌的感染實現外源基因向植物細胞的轉移與整合,然後通過細胞和組織培養技術,再生出轉基因植株。

特點:操作簡便、成本低、轉化率高,廣泛應用於雙子葉植物的遺傳轉化。

基因槍轉化:

轉化原理:利用火藥**或高壓氣體加速,將包裹了帶目的基因的dna溶液的高速微彈直接送入完整的植物組織和細胞中,然後通過細胞和組織培養技術,再生出植株,選出其中轉基因陽性植株即為轉基因植株。

特點:基因槍轉化率差異很大,相對於農桿菌介導的轉化率要低得多,而且基因槍轉化成本高,嵌合體比率大,遺傳穩定性差。它的一個主要優點是不受受體植物範圍的限制,而且其載體質粒的構建也相對簡單。

花粉管通道法:

轉化原理:在授粉後向子房注射合目的基因的dna溶液,利用植物在開花、受精過程中形成的花粉管通道,將外源dna匯入受精卵細胞,並進一步地被整合到受體細胞的基因組中,隨著受精卵的發育而成為帶轉基因的新個體。

特點:不依賴組織培養人工再生植株,技術簡單,不需要裝備精良的實驗室,常規育種工作者易於掌握。

2樓:匿名使用者

植物轉化的原理是基因重組,也是基因工程的原理。

方法教材有。

植物dna提取的原理和方法?其中乙醇和氯仿一異成醇各起什麼作用

3樓:

植物dna提取方法是採用ctab法。

ctab,是一種陽離子去汙劑,能與核酸形成複合物,此複合物在高鹽(>0.7mol/l) 濃度下可溶,並穩定存在,但在低鹽濃度(0.1~0.

5mol/l nacl)下ctab-核酸複合物就因溶解度降低而沉澱,而大部分的蛋白質及多糖等仍溶解於溶液中。通過有機溶劑抽提,去除蛋白、多糖、酚類等雜質後加入乙醇沉澱即可使核酸分離出來。經離心棄上清後,ctab-核酸複合物再用70%酒精浸泡可洗脫掉ctab。

無水乙醇:沉澱dna。乙醇的優點是可以任意比和水相混溶,乙醇與核酸不會起任何化學反應,對dna很安全,因此是理想的沉澱劑。

dna溶液是dna以水合狀態穩定存在,當加入乙醇時,乙醇會奪去dna周圍的水分子,使dna失水而易於聚合。

氯仿:克服酚的缺點;加速有機相與液相分層。

異戊醇:減少蛋白質變性操作過程中產生的氣泡。異戊醇可以降低表面張力,從而減少氣泡產生。

另外,異戊醇有助於分相,使離心後的上層含dna的水相、中間的變性蛋白相及下層有機溶劑相維持穩定。

植物DNA提取的原理和方法是什麼

原理就是去掉植物細胞壁 細胞膜 質體 線粒體 葉綠體 剩下細胞核了。就是dna了。通常採用機械研磨的方法破碎植物的組織和細胞,由於植物細胞勻漿含有多種酶類 尤其是氧化酶類 對dna的抽提產生不利的影響,在抽提緩衝液中需加入抗氧化劑或強還原劑 如巰基乙醇 以降低這些酶類的活性。在液氮中研磨,材料易於破...

植物色素的提取能用arnon方法嗎

arnon是傳統的葉綠素測定方法,是將材料在80 丙酮溶液中研磨並經過濾或離心除去殘渣後,測定提取液的光密度值來計算葉綠素含量,所以是使用分光光度計測量光的吸收值繼而估算出色素的含量。二甲基亞碸 dmso 直接浸提高等植物葉綠素,同樣是測定提取液的光密度值來計算葉綠素含量,但步驟較為簡省,但是對實驗...

鉗表的使用方法與工作原理,鉗表的作用 原理

鉗形萬用表,是種非常常見的電工用具,其鉗形夾,只能用於交流測試中。工作原理 鉗形萬用表表頭是根據電流互感器的原理製成的,專門用於測量交流電流。鉗形萬用表的測量電流部分是由電流互感器和萬用表的電流測量部分組成。互感器的鐵芯有一個活動部分,並與手柄相連,使用時按動手柄使活動鐵芯張開。將被測電流的導線放入...