1樓:匿名使用者
你應該說的是植物三種不同的基因轉化方法吧!
農桿菌介導基因轉化:
轉化原理:農桿菌是普遍存在於土壤中的一種革蘭氏陰性細菌,它能在自然條件下趨化性地感染大多數雙子葉植物的受傷部位,並誘導產生冠癭瘤或髮狀根。根癌農桿菌和髮根農桿菌中細胞中分別含有ti質粒和ri質粒,其上有一段t-dna,農桿菌通過侵染植物傷口進入細胞後,可將t-dna插入到植物基因組中,並且可以通過減速**穩定的遺傳給後代,這一特性成為農桿菌介導法植物轉基因的理論基礎。
人們將目的基因插入到經過改造的t-dna區,藉助農桿菌的感染實現外源基因向植物細胞的轉移與整合,然後通過細胞和組織培養技術,再生出轉基因植株。
特點:操作簡便、成本低、轉化率高,廣泛應用於雙子葉植物的遺傳轉化。
基因槍轉化:
轉化原理:利用火藥**或高壓氣體加速,將包裹了帶目的基因的dna溶液的高速微彈直接送入完整的植物組織和細胞中,然後通過細胞和組織培養技術,再生出植株,選出其中轉基因陽性植株即為轉基因植株。
特點:基因槍轉化率差異很大,相對於農桿菌介導的轉化率要低得多,而且基因槍轉化成本高,嵌合體比率大,遺傳穩定性差。它的一個主要優點是不受受體植物範圍的限制,而且其載體質粒的構建也相對簡單。
花粉管通道法:
轉化原理:在授粉後向子房注射合目的基因的dna溶液,利用植物在開花、受精過程中形成的花粉管通道,將外源dna匯入受精卵細胞,並進一步地被整合到受體細胞的基因組中,隨著受精卵的發育而成為帶轉基因的新個體。
特點:不依賴組織培養人工再生植株,技術簡單,不需要裝備精良的實驗室,常規育種工作者易於掌握。
2樓:匿名使用者
植物轉化的原理是基因重組,也是基因工程的原理。
方法教材有。
植物dna提取的原理和方法?其中乙醇和氯仿一異成醇各起什麼作用
3樓:
植物dna提取方法是採用ctab法。
ctab,是一種陽離子去汙劑,能與核酸形成複合物,此複合物在高鹽(>0.7mol/l) 濃度下可溶,並穩定存在,但在低鹽濃度(0.1~0.
5mol/l nacl)下ctab-核酸複合物就因溶解度降低而沉澱,而大部分的蛋白質及多糖等仍溶解於溶液中。通過有機溶劑抽提,去除蛋白、多糖、酚類等雜質後加入乙醇沉澱即可使核酸分離出來。經離心棄上清後,ctab-核酸複合物再用70%酒精浸泡可洗脫掉ctab。
無水乙醇:沉澱dna。乙醇的優點是可以任意比和水相混溶,乙醇與核酸不會起任何化學反應,對dna很安全,因此是理想的沉澱劑。
dna溶液是dna以水合狀態穩定存在,當加入乙醇時,乙醇會奪去dna周圍的水分子,使dna失水而易於聚合。
氯仿:克服酚的缺點;加速有機相與液相分層。
異戊醇:減少蛋白質變性操作過程中產生的氣泡。異戊醇可以降低表面張力,從而減少氣泡產生。
另外,異戊醇有助於分相,使離心後的上層含dna的水相、中間的變性蛋白相及下層有機溶劑相維持穩定。
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