1樓：
自己看，我也沒有學好
2樓：蓴灬叔
(1)n-末端測定
a.二硝基氟苯法(fdnb,dnfb)：2023年sanger提出此方法，是他的重要貢獻之一。
dnp-氨基酸用有機溶劑抽提後，通過層析位置可鑑定它是何種氨基酸。sanger用此方法測定了胰島素的n末端分別為甘氨酸及苯丙氨酸。
b.氰酸鹽法：2023年stank及smyth介紹了一種測定n末端的新方法,步驟如下：
由於乙內醯脲氨基酸不帶電荷，因此可用離子交換層析法將它與遊離氨基酸分開，分離所得的乙內醯脲氨基酸再被鹽酸水解，重新生成遊離的氨基酸，鑑別此氨基酸即可瞭解n-末端是何種氨基酸。
c.二甲基氨基萘磺醯氯法：2023年hartley等報告了一種測定n-末端的靈敏方法，採用1-二甲基氨基萘-5-磺醯氯,簡稱丹磺醯氯。
它與遊離氨基末端作用，方法類似於sanger的dnfb法，產物是磺醯胺衍生物。
丹磺醯鏈酸具有強烈的黃色熒光。此法優點為靈敏性較高(比fdnb法提高100倍，樣品量小於1毫微克分子)及丹磺醯氨基酸穩定性較高(對酸水解穩定性較dnp氨基酸高)，可用紙電泳或聚醯胺薄膜層析鑑定。
(2)c-末端分析
a.肼解法：這是測定c-末端最常用的方法。將多肽溶於無水肼中，100℃下進行反應，結果羧基末端氨基酸以遊離氨基酸狀釋放，而其餘肽鏈部分與肼生成氨基酸肼。
這樣羧基末端氨基酸可以採用抽提或離子交換層析的方法將其分出而進行分析。如果羧基末端氨基酸側鏈是帶有醯胺如天冬醯胺和谷氨醯胺，則肼解時不能產生遊離的羧基末端氨基酸。此外肼解時注意避免任何少量的水解，以免釋出的氨基酸混淆末端分析。
b.羧肽酶水解法：羧肽酶可以專一性地水解羧基末端氨基酸。
根據酶解的專一性不同，可區分為羧肽酶a、b和c。應用羧肽酶測定末端時，需要事先進行酶的動力學實驗，以便選擇合適的酶濃度及反應時間，使釋放出的氨基酸主要是c末端氨基酸。
3樓：鹿濮赫山菡
蛋白質n端和c端的測定方法是什麼？基本原理是什麼二硝基氟苯法(fdnb法)
2、二甲基氨基萘磺醯氯法(dns-cl法)3、異硫氰酸笨酯法(edman法)
c-末端分析1、肼解法
2、還原法
通常蛋白質含量測定的方法有哪些，比較優缺點
定氮法，雙縮尿法 biuret法 folin 酚試劑法 lowry法 和紫外吸收法。考馬斯亮藍法 bradford法 凱氏定氮 靈敏度低，適用於0.2 1.0mg氮，誤差為 2 費時 8 10小時 將蛋白氮轉化為氨，用酸吸收後滴定 非蛋白氮 可用三氯乙酸沉澱蛋白質而分離 用於標準蛋白質含量的準確測定...
試述凱氏定氮法測定粗蛋白質的原理 方法及注意事項。試說明該方法存在的不足，並對該方法提出改進方法
1 試劑的配製 粗蛋白測定中所用的化學藥品如濃硫酸 鹽酸 氫氧化鈉 硼酸 硫酸銅 硫酸鉀 硫酸鈉 硫酸銨 蔗糖等均為化學純，標定鹽酸標準溶液用的無水碳酸鈉為基準試劑。在配製試劑前一定要用ph試紙或酸度計檢測一下蒸餾水是否為中性，所用的燒杯 試劑瓶等配液裝置清洗乾淨。1.1 鹽酸標準溶液的配製 配製的...
檢測生物組織中糖類 脂肪和蛋白質的方法
你說的那個童話 糖類 1.製備組織樣液。組織液 細胞液 蘋果或梨組織液必須臨時製備 因蘋果多酚氧化酶含量高，組織液很易被氧化成褐色，將產生的顏色掩蓋。2.注入2ml組織樣液。3.注入1ml新制的斐林試劑，振盪。現配現用 先混後加 應將組成斐林試劑的甲液 乙液分別配製 儲存，使用前才將甲 乙液等量混勻...