1樓:娛樂解說課
19℃環境下暗培養1~3天。
農桿菌(agrobacterium)是生活在植物根的表面依靠由根組織滲透出來的營養物質生存的一類普遍存在於土壤中的革蘭氏陰性細菌。農桿菌介導法 是模仿農桿菌都植物的進化誘導。
農桿菌主要有兩種:根癌農桿菌(agrobacteriumtumefaciens)和髮根農桿菌(agrobacteriumrhizogenes)。根癌農桿菌能在自然條件下趨化性地感染140多種雙子葉植物或裸子植物的受傷部位,並誘導產生冠癭瘤。
引發冠癭瘤的原因是,ti質粒上的t-dna上有8個左右的基因在植物細胞內表達,指導合成一種非常特殊的化合物冠癭鹼,進而引起轉化細胞癌變。而髮根農桿菌則誘導產生髮狀根,其特徵是大量增生高度分支的根系。根癌農桿菌的ti質粒和髮根農桿菌的ri質粒上有一段t-dna,農桿菌通過侵染植物傷口進入細胞後,可將t-dna插入到植物基因組中。
因此,農桿菌是一種天然的植物遺傳轉化體系,被譽為「自然界最小的遺傳工程師」[1] 。可以通過將目的基因插入到經過改造的t-dna區,藉助農桿菌的感染實現外源基因向植物細胞的轉移和整合,然後通過細胞和組織培養技術,得到轉基因植物。
2樓:匿名使用者
28℃ 暗培養過夜 液體的150~220轉搖菌,或者19℃暗培養1~3天
農桿菌的培養中用lb培養基好還是yep培養基,它們有什麼區別
3樓:北京索萊寶科技****
大腸桿菌常用lb培養基,
配方如下:5g/l yeast extract (酵母膏)10g/l tryptone (胰蛋白腖)10g/l sodium chloride (nacl)ph 7.4
農桿菌常用yeb培養基,
配方如下:
beef extract (牛肉浸膏) 5g/l yeast extract (酵母膏) 1g/l
peptone (蛋白腖) 5g/l sucrose (蔗糖) 5g/l
mgso4.7h2o 0.4g/100mlagar (瓊脂) 1.5g/100ml 【固體培養基加瓊脂】ph 7.4
看到區別了吧?不同菌的培養基是微生物學家精心篩選出來的,最有利於該細菌生長的培養基.
可以說,上述兩種培養基都能培養農桿菌,但是yeb更適合,所以更好.
有沒有人這樣培養過農桿菌? 做植物轉化的。。
4樓:xxd糰子
你這個方法,是為了做農桿菌的感受態,後期轉化備用?
這個方法我沒有接觸過。
傳統的農內桿菌感受態製法和大腸桿菌感受態製法類似,轉化效率挺高的,實驗室一直用的這個方法。
如果你這個是培養農桿菌,為什麼要用硫酸鎂活化而不是yeb液體培養基?這容個可以培養農桿菌?同問,求解釋
一般來說,農桿菌轉化也和大腸桿菌類似,
製備農桿菌感受態,然後將重組體轉化至農桿菌感受態細胞中,最後用這個轉化後的農桿菌去侵染你的植物。
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