1樓：angela韓雪倩
如果是單酶切，超螺旋質粒會變成開鏈dna，開鏈的dna在凝膠中泳動速度慢於超螺旋質粒，因此條帶會偏大，這是酶切充分的情況。如果不充分，就會有大小有差距的幾條帶；
如果是雙酶切，而且片段大小適中，可以看見酶切的片段和載體，還有未切開的質粒。
能不能區分超螺旋質粒和開鏈質粒，和所用瓊脂糖凝膠的濃度，電泳時間，dna純度有關。試著延長跑膠的時間，應當是有區別的。酶切之前就有幾條帶，可能是因為質粒樣品中有雜帶，**於雜菌或者降解。
2樓：沫語秋沿
酶切前，質粒電泳圖一般是三條條帶，並認為這三條帶從上到下一次是線性、開環、超螺旋。其實可能會比這條帶更多些，可以認為是中間複合體狀態。
酶切後，因為超螺旋狀態的質粒被切成線性，所以條帶會有一條條帶。如果是雙酶切，或是質粒上的酶切位點比較多的話，會有兩條或更多條帶。
3樓：匿名使用者
酶切前由於是環狀的，電泳率較高；
酶切後由於dna結構變成直鏈，阻力變大，電泳率變低，就跑的不如環狀質粒那麼快了
pcr產物和質粒雙酶切後電泳如何判斷酶切完成？
4樓：35豆豆
pcr產物酶切後不能判斷是否完全..
質粒如果切下來的片斷不是很小,可以取少量進行電泳檢視條帶..如果沒有完全酶切,大條帶會出現單酶切的產物條帶.
5樓：匿名使用者
你是不是要把雙酶切後的質粒與載體連線，而無論是pcr還是載體都無法通過電泳判斷是否酶切完全，所以不好進行連線呀？對於pcr產物一般會採取這樣的策略，將產物首先連線到t載體上，然後再用設計好的雙酶切，電泳**切下的條帶，這樣就能確保得到的是完全酶切的產物。載體判斷比較麻煩，要看載體本身、多大雙酶切為點之間的條帶有多大、雙切前後的大小是否能通過電泳區別出來，但是雙切位點一般都在標記基因裡面，所以插入片段的載體會在後期轉化可以後區分開，所以也沒有太大必要確定他是否完全，只要充分酶切就好了。
6樓：百浩生物
這個一般酶切一到兩個小時就結束。再去電泳分離，將你要的片段（根據理論大小）切膠**。
因而你不用去判斷是否酶切完成或者完全酶切開了（只要90%或者以上的都切開就行了）。如果你非要百分之百的切開，可能電泳也難以檢測。而且意義不大。
如果你想節省內切酶，也可以切過夜。不過如果你的質粒提的質量不高，可能讓質粒降解。一般兩個小時足夠了。
7樓：
1、你的實驗目的是什麼？
2、如果是克隆，連線t載體後不用酶切，直接轉化菌落pcr檢測有目的條帶的話送樣測序即可。
3、如果是做表達載體構建，pcr產物和質粒dna酶切後與沒有酶切的在同一塊膠上電泳，如果兩個酶切位點很近，幾乎看不到被切下來的小片段條帶（太小，早就跑出去了）。你要是怕酶切不完全就多稍微加點酶，切的時間長一點。
4、關於酶切產物有幾條帶視酶切效果而定，酶切完全則兩條，一大一小（小的可能看不到，原因見3、）酶切不完全則三條帶，一大一小及未切開的pcr產物；質粒的話可能還多一條環狀分子和線狀分子的區別。
PCR產物和質粒雙酶切後電泳如何判斷酶切完成
35豆豆 pcr產物酶切後不能判斷是否完全.質粒如果切下來的片斷不是很小,可以取少量進行電泳檢視條帶.如果沒有完全酶切,大條帶會出現單酶切的產物條帶. 你是不是要把雙酶切後的質粒與載體連線，而無論是pcr還是載體都無法通過電泳判斷是否酶切完全，所以不好進行連線呀？對於pcr產物一般會採取這樣的策略，...
瓊脂糖凝膠電泳的DNA為什麼要酶切
雷昊文庫 你好 我所知道的酶切的目的大致分為兩大類 載體的檢測和southern預備實驗。你做的如果是常規的pcr檢測，一般不需要酶切後再電泳，只是檢測一下你的目的基因是否成功進入你的受體材料，酶切後反而看不出來了。酶切的依據是你自己的載體圖中酶切位點的位置與類別，根據不同的酶切位點選擇不同種類的酶...
dna限制酶切和瓊脂糖凝膠電泳中常說的marker是什麼？還
小蠻 dna的限制性酶切 限制性內切酶特異性地結合於一段被稱為限制酶識別序列的特殊dna序列之內或其附近的特異位點上，並在此處切割雙鏈dna。loading buffer 的中文名字叫上樣緩衝液,6 的緩衝液中可以顯示兩條帶，前面的藍色的條帶是溴酚藍，代表的片段大小是 300bp，後面的有點綠色的條...