1樓：墨汁諾
一、反應不同：
wb可以反映出分子量的資訊，elisa不能。
wb一般只能做到半定量，elisa一般可以定量。
二、檢測不同：
基因翻譯蛋白質, pcr可以檢測基因的表達量，絕對定量和相對定量。但基因翻譯表達蛋白質是個複雜的過程，有可能出現基因量大而蛋白質少，或者相反，甚至其他情況。
pcr是從基因層面dna或mrna進行的檢測， 而western blot是目前一種結合內參對蛋白質進行半定量的方法，elisa可以定量檢測某些蛋白、激素等。
三、靈敏度不同：
靈敏度 一般elisa的靈敏度要遠高於wb，這從一般酶標記物的使用濃度或待檢樣品的稀釋度上就可以看出。可操作性wb一次處理量就是一塊膠版，10-20個樣品最多了。
elisa一塊96孔板一次可以處理96個樣本，可以設定多個復孔、對照、梯度樣等來提高檢測的可信度。wb操作常見的非特異性條帶，膜本底差，顯色不好等等缺點在elisa上表現得要好得多。
2樓：匿名使用者
western blot和elisa的基本原理是一樣的，都是免疫結合反應的原理。差別主要是技術方法，免疫結合的模式，檢測的目的等
western blot需要先電泳後轉膜，然後免疫結合，雖然操作複雜但不需要很高階的儀器裝置
elisa沒有這麼複雜的操作，但是需要酶標儀這樣比較貴的儀器
western blot的免疫模式基本是抗原結合抗體，抗體結合二抗酶
elisa模式更加不固定一些，可以是抗原 抗體 二抗酶，也可以是抗原 抗體 抗原酶，或者抗體 抗原 抗體酶等等
western blot更偏向於定性的檢測，定量也只能是通過比較的半定量，誤差可能很大
elisa既可以定性也能非常精確的定量
elisa技術和western的不同是什麼 10
3樓：百優生物
免疫學三大工具，免疫組化、western、elisa，分別用於定位，定性和定量，各有各的功能。
western用於測分子量，elisa用於測濃度。
他們在測量前都要一個尺子（標準），但western的尺子上標的是分子量（kd），elisa的尺子上標的是濃度。
western用的是蛋白marker（已知大小的幾條蛋白），與蛋白一起電泳（不同泳道），實驗結束後知道目標蛋白的大小。
elisa用的是標準品（已知濃度的蛋白，自己稀釋成不同濃度），與未知相本一起反應（不同孔），實驗結束後判斷目標蛋白的濃度。
至於他們的後期原理，都是用抗體與目標蛋白反應，再加一個hrp標記的二抗，hrp可以讓dab顯色（western是dab或者ecl發光，在膜上顯色，而elisa用tmb顯色，顏色在孔裡面，）
當然，實際操作也沒這麼簡單，但後期利用的原理是相當的。
4樓：少陵五老
酶聯免疫吸附試驗
酶聯免疫吸附試驗（又稱酵素免疫分析法，enzyme-linked immunoassay，簡稱elisa）利用抗原抗體之間專一性鍵結之特性，對檢體進行檢測；由於結合於固體承載物(一般為塑膠孔盤)上之抗原或抗體仍可具有免疫活性，因此設計其鍵結機制後，配合酵素呈色反應，即可顯示特定抗原或抗體是否存在，並可利用呈色之深淺進行定量分析。根據待測樣品與鍵結機制的不同，elisa可設計出各種不同型別的檢測方式，主要以三明治法（sandwich）、間接法（indirect）、以及競爭法（competitive）三種為主。
western blot
是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法，也是hiv檢測的方法之一。
利用特定抗體能夠專一結合其抗原蛋白質的原理來對樣品進行著色，通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中的表達情況的資訊，來分析檢測特定蛋白質的生物學檢測技術。
發明者一般認為是美國斯坦福大學的喬治·斯塔克（george stark）。在尼爾·伯奈特（neal burnette）於2023年所著的《分析生物化學》（analytical biochemistry）中首次被稱為western blot。
western blot與southern或northern雜交方法類似，但western blot採用的是聚丙烯醯胺凝膠電泳，被檢測物是蛋白質，「探針」是抗體，「顯色」用標記的二抗。經過page分離的蛋白質樣品，轉移到固相載體（例如硝酸纖維素薄膜）上，固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質，且能保持電泳分離的多肽型別及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原，與對應的抗體起免疫反應，再與酶或同位素標記的第二抗體起反應，經過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。
該技術也廣泛應用於檢測蛋白水平的表達。
western blot內參和marker的區別
看到你的目的蛋白條帶在30和35kd之間，就可以初步斷定是你的目的蛋白。2.內參呢，內參也叫看家基因，在組織或細胞中都會表達，且表達量在不同組織或細胞中幾乎是相同的，一般有 actin，gapdh等。其作用有二，1.是看提取蛋白質量的好壞。如果做western的時候，內參照蛋白有條帶，而目的蛋白沒有...
western blot用的一抗識別的是什麼表位的
現在的市面上買的抗體很少是識別空間表位的 一般都是識別蛋白質一段保守的特異的氨基酸序列這個就足夠了 所以sds page變性了之後還是能識別的 誰說抗體都是識別空間表位的？sds page用的抗體就是識別線性表位的嘛 一抗一般都是識別的氨基酸序列的 製作一抗時，就是把所要的蛋白質進行原核表達，表達完...
western blot轉膜不完全怎麼辦？
個人建議時間不要再長了，再長蛋白有可能變性造成後續實驗無法進行。我原來遇到這類問題是用以下幾種方法嘗試解決的，你也可以嘗試一下。1 檢查一下你的三明治結構夾的怎麼樣，尤其是膜及濾紙的邊緣是不是有短接的地方，這個是最容易出現的問題。另外膜和膠之間是不是有氣泡，不推薦用外力去擀壓膜和膠，推薦用緩衝液潤溼...