1樓：兄弟連教育
一、做elisa試劑盒標準曲線樣品檢測時有幾個問題需要注意
1、樣品的濃度等指標是根據標準曲線計算出來的，所以首先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事，否則後面的實驗結果無從談起。
2、設定標準曲線樣品的標準濃度範圍要有一個比較大的跨度，並且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度，即樣品的濃度要在標準曲線濃度範圍之內，包括上限和下限。而對於呈s型的標準曲線，儘量要使實驗樣品的濃度在中間坡度最陡段，即曲線幾乎成直線的範圍內。
3、最好採用倍比稀釋法配製標準曲線中的標準樣品濃度，elisa試劑盒這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會出現較大的偏離。
4、檢測標準樣品時，應按濃度遞增順序進行，以減少高濃度對低濃度的影響，提高準確性。
5、標準曲線的樣品數一般為7個點，但至少要保證有5個點。
6、做出的標準曲線相關係數因實驗要求不同而有所變動，但一般來說，相關係數r至少要大於0.98，對於有些實驗，至少要0.99甚至是0.999.
二、選擇什麼方程去擬合
在s曲線的低濃度部門可以用乘冪方程很好的擬合，中低濃度部門可以用直線方程，中間部門可用對數方程，而中後段可用四引數。免疫檢測時尺度點（可以是倍比
稀釋的，也可以不是）濃度假如和相應的吸光度（od）值假如能夠呈現直線關係當然是最理想的了，這時可以通過exell等利便的獲得擬合曲線，進而推算出
樣品的濃度值。
關於尺度曲線的擬合方式，直線、二次曲線、三次曲線、指數、對數等雖都可用於elisa及其它生物學反應中的曲線擬合，但都只合用於曲線的一部門，有的合用於前半段，有的合用於後半段，有的合用於中間一段，而logistic曲線則對曲線的全部都有較好的合用性。
在一個長的區間內，logistic應該都能擬合得較為理想。假如用來定量，s形曲線的中間段（較陡處）是比較好的，而兩真個平坦部門計算誤差會大，有時
甚至會很大。用於免疫檢測的所謂「尺度曲線"實在稱為擬合曲線比較合適。目前國際上最流行的免疫檢測擬合方式是「四引數邏輯擬合"，用這種擬合方式往往能
夠比較精確的反映濃度和吸光度的曲線關係，從而進一步比較準確的獲得樣品中待測物質的濃度值。但我們做免疫檢測很少有時候能夠有這麼理想的情況，標品濃度
和相應od值往往是"s"型的曲線關係，這時就不能用直線擬合的方式了，而對擬合方法進行選擇就是必要的了。樞紐在於你的尺度曲線做到了s形的哪一部門，
你想檢測的樣品濃度在曲線的哪一部門。當然，假如用於定量，仍是在中間一段較好。但建模型是一回事，elisa試劑盒而用它來定量是另一回事。這些方法固
然沒有一種方法可以通用，但也都可以用。但並不是說它就是萬能的。事實上不僅是elisa，其它良多生物學反應都是s形曲線，也都可以用logistic曲線擬合。
2樓：書飛凝
1、樣品的濃度等指標是根據標準曲線計算出來的，所以首先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事，否則後面的實驗結果無從談起。
2、設定標準曲線樣品的標準濃度範圍要有一個比較大的跨度，並且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度，即樣品的濃度要在標準曲線濃度範圍之內，包括上限和下限。而對於呈s型的標準曲線，儘量要使實驗樣品的濃度在中間坡度最陡段，即曲線幾乎成直線的範圍內。
3、最好採用倍比稀釋法配製標準曲線中的標準樣品濃度，elisa試劑盒這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會出現較大的偏離。
4、檢測標準樣品時，應按濃度遞增順序進行，以減少高濃度對低濃度的影響，提高準確性。
5、標準曲線的樣品數一般為7個點，但至少要保證有5個點。
6、做出的標準曲線相關係數因實驗要求不同而有所變動，但一般來說，相關係數r至少要大於0.98，對於有些實驗，至少要0.99甚至是0.999.
二、選擇什麼方程去擬合
在s曲線的低濃度部門可以用乘冪方程很好的擬合，中低濃度部門可以用直線方程，中間部門可用對數方程，而中後段可用四引數。免疫檢測時尺度點（可以是倍比稀釋的，也可以不是）濃度假如和相應的吸光度（od）值假如能夠呈現直線關係當然是最理想的了，這時可以通過exell等利便的獲得擬合曲線，進而推算出樣品的濃度值。
關於尺度曲線的擬合方式，直線、二次曲線、三次曲線、指數、對數等雖都可用於elisa及其它生物學反應中的曲線擬合，但都只合用於曲線的一部門，有的合用於前半段，有的合用於後半段，有的合用於中間一段，而logistic曲線則對曲線的全部都有較好的合用性。
在一個長的區間內，logistic應該都能擬合得較為理想。假如用來定量，s形曲線的中間段（較陡處）是比較好的，而兩真個平坦部門計算誤差會大，有時甚至會很大。用於免疫檢測的所謂「尺度曲線"實在稱為擬合曲線比較合適。
目前國際上最流行的免疫檢測擬合方式是「四引數邏輯擬合"，用這種擬合方式往往能夠比較精確的反映濃度和吸光度的曲線關係，從而進一步比較準確的獲得樣品中待測物質的濃度值。但我們做免疫檢測很少有時候能夠有這麼理想的情況，標品濃度和相應od值往往是"s"型的曲線關係，這時就不能用直線擬合的方式了，而對擬合方法進行選擇就是必要的了。樞紐在於你的尺度曲線做到了s形的哪一部門，你想檢測的樣品濃度在曲線的哪一部門。
當然，假如用於定量，仍是在中間一段較好。但建模型是一回事，elisa試劑盒而用它來定量是另一回事。這些方法固然沒有一種方法可以通用，但也都可以用。
但並不是說它就是萬能的。事實上不僅是elisa，其它良多生物學反應都是s形曲線，也都可以用logistic曲線擬合。
如何繪製elisa標準曲線
3樓：
一、做elisa試劑盒標準曲線樣品檢測時有幾個問題需要注意
1、樣品的濃度等指標是根據標準曲線計算出來的，所以首先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事，否則後面的實驗結果無從談起。
2、設定標準曲線樣品的標準濃度範圍要有一個比較大的跨度，並且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度，即樣品的濃度要在標準曲線濃度範圍之內，包括上限和下限。而對於呈s型的標準曲線，儘量要使實驗樣品的濃度在中間坡度最陡段，即曲線幾乎成直線的範圍內。
3、最好採用倍比稀釋法配製標準曲線中的標準樣品濃度，elisa試劑盒這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會出現較大的偏離。
4、檢測標準樣品時，應按濃度遞增順序進行，以減少高濃度對低濃度的影響，提高準確性。
5、標準曲線的樣品數一般為7個點，但至少要保證有5個點。
6、做出的標準曲線相關係數因實驗要求不同而有所變動，但一般來說，相關係數r至少要大於0.98，對於有些實驗，至少要0.99甚至是0.999.
二、選擇什麼方程去擬合
在s曲線的低濃度部門可以用乘冪方程很好的擬合，中低濃度部門可以用直線方程，中間部門可用對數方程，而中後段可用四引數。免疫檢測時尺度點（可以是倍比
稀釋的，也可以不是）濃度假如和相應的吸光度（od）值假如能夠呈現直線關係當然是最理想的了，這時可以通過exell等利便的獲得擬合曲線，進而推算出
樣品的濃度值。
關於尺度曲線的擬合方式，直線、二次曲線、三次曲線、指數、對數等雖都可用於elisa及其它生物學反應中的曲線擬合，但都只合用於曲線的一部門，有的合用於前半段，有的合用於後半段，有的合用於中間一段，而logistic曲線則對曲線的全部都有較好的合用性。
在一個長的區間內，logistic應該都能擬合得較為理想。假如用來定量，s形曲線的中間段（較陡處）是比較好的，而兩真個平坦部門計算誤差會大，有時
甚至會很大。用於免疫檢測的所謂「尺度曲線"實在稱為擬合曲線比較合適。目前國際上最流行的免疫檢測擬合方式是「四引數邏輯擬合"，用這種擬合方式往往能
夠比較精確的反映濃度和吸光度的曲線關係，從而進一步比較準確的獲得樣品中待測物質的濃度值。但我們做免疫檢測很少有時候能夠有這麼理想的情況，標品濃度
和相應od值往往是"s"型的曲線關係，這時就不能用直線擬合的方式了，而對擬合方法進行選擇就是必要的了。樞紐在於你的尺度曲線做到了s形的哪一部門，
你想檢測的樣品濃度在曲線的哪一部門。當然，假如用於定量，仍是在中間一段較好。但建模型是一回事，elisa試劑盒而用它來定量是另一回事。這些方法固
然沒有一種方法可以通用，但也都可以用。但並不是說它就是萬能的。事實上不僅是elisa，其它良多生物學反應都是s形曲線，也都可以用logistic曲線擬合。
剛剛學會用excel繪製elisa標準曲線，請問怎樣在excel中應用這個曲線得到的公式計算樣本的濃度呢，謝謝
4樓：終蕊勞子
可以利用excel散點圖新增趨勢線之後顯示公式實現。
首先假設**如下圖，a列為吸光度，b列為標準品的濃度。
第一步：選中**區域，插入建立以吸光度為橫座標（x軸）、濃度為縱座標（y軸）的散點圖。
5樓：匿名使用者
有了來公式以後,手動解一下方程源,得到一個公式bai: 濃度=fx(od) 然後在
duexcel裡面把od值帶入zhi,按照這個公式計算就行dao了. excel裡面編輯公式應該會吧? 否則去面壁30min再好好學學excel.
另外, 你可以用更專業的軟體來做計算,比如: softmax pro.
這個軟體可以提供更好的擬合方式 (4pl, 5pl), 而且可以全自動的計算,用起來非常方便.
網上可以找到免費的版本. good luck!
6樓：匿名使用者
你把od值作為橫座標,標準品的濃度作為縱座標,畫出趨勢線再算出公式（y關於x的一個方程式。）
最後將你的樣品的od值作為你的x值，代入公式，算出來的y值就是你的樣品濃度了。
7樓：鯉
有了公式以後,手動解一下方程,得到一個公式: 濃度=fx(od) 然後在excel裡面把od值帶入,按照這個公式計專算就行了屬. excel裡面編輯公式應該會吧?
否則去面壁30min再好好學學excel.
另外, 你可以用更專業的軟體來做計算,比如: softmax pro.
這個軟體可以提供更好的擬合方式 (4pl, 5pl), 而且可以全自動的計算,用起來非常方便.
網上可以找到免費的版本. good luck!
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