1樓:匿名使用者
用專門的試劑盒來做吧,然後按照說明書操作,挺方便的。我們實驗室以前用的biog熒光定量pcr試劑盒,反應挺靈敏的,實驗結果也不錯,而且染料法和探針法都有。
2樓:匿名使用者
可以用引物設計軟體,primer5就挺不錯的。你是要檢測dna還是rna?探針法檢測dna的話可以用biog super probe kit,檢測rna的話可以用biog super prob one step kit。
普通pcr引物設計和熒光定量pcr引物設計的區別
3樓:匿名使用者
一、方法不同
來1、普自通pcr引物設計:引物的優劣直接關係到pcr的特異性與成功與否。
2、熒光定量pcr引物設計:通過熒光染料或熒游標記的特異性探針,標記跟蹤pcr產物進行實時監測反應,利用與之相適應的軟體對產物進行分析,計算待測樣品模板的初始濃度
二、原理不同
1、普通pcr引物設計:為了找到一對合適的核苷酸片段,使其能有效地擴增模板dna序列。
2、熒光定量pcr引物設計:在pcr反應體系中加入熒光基團,通過熒光訊號不斷累積而實現實時監測pcr全程,然後通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。在實時熒光定量pcr中,對全程pcr擴增過程進行實時檢測,根據反應時間和熒光訊號的變化可以繪製成一條曲線。
三、注意事項不同
1、普通pcr引物設計:引物應用核酸系列保守區內設計並具有特異性。產物不能形成二級結構。引物長度在15~30鹼基之間。
2、熒光定量pcr引物設計:實時熒光定量 pcr 儀應安放在溼度較低、灰塵較少、遠離水池的平穩檯面上,不能有強光直射,室內應通風良好,無腐蝕性氣體
4樓:南京金益柏生物科技****
實時定量bai的引物設計du要求比較高,可
以按zhi普通引物設計的方法來做,dao但是回設計時要注意擴增的片段答不能太大,最好在250bp-100bp之間。同時要保證這對引物有絕對的特異性,因為要是產生非特異性擴增的話,就不能準確的計量模板量了,這樣就失去了實時定...
5樓:
實時定量的引物抄
設計要求比較高,可以按普通bai引物設計的方法來做,但du是設計時要注zhi意擴增的片段dao不能太大,最好在250bp-100bp之間。同時要保證這對引物有絕對的特異性,因為要是產生非特異性擴增的話,就不能準確的計量模板量了,這樣就失去了實時定...
6樓:
建議來你還是選擇cds區不一自樣的地方設計bai引物吧,這樣可以避免du交叉汙染引起zhi的非特異擴增,dao擴增的序列長度不一定要一樣,每個引物你最好設計兩三對,然後做一個相對定量看看不同引物的擴增效率,選擇比較好的兩對引物做後續試驗,內參基因的引物不需...
7樓:
nf-kbmrna不就是nf-kb的mrna麼 做定量pcr就是測它mrna的表達量啊 nf-kbp65是nf-kb3 nf-kbp52是nf-kb2 所以這兩個還是有區別的 如果你是要檢測65的話
實時熒光定量PCR儀國產有哪些,價格及相關技術引數
東林的觸屏pcr儀不錯,新品上市,8英寸高解析度觸控式螢幕 具有高度靈活性,多種模組容量選擇,滿足多種實驗需求。到鼎國生物瞭解諮詢吧。 biosaferpcr儀引數參考 1 樣品臺 標準模組 96 0.2ml 77 0.5ml混合模組 可另選384well模組a 96 0.2ml模組b 54 0.5...
如何評價設計師王平仲及他的設計
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混凝土樓板開洞後,如何封堵的設計及施工方案?(文字說明)
樓上說的是小於300 300的樓板洞的施工方法吧,既然要設計及施工方案說明洞大於300 300的,這樣的洞封堵需要佈置鋼筋的,不能單純的用砼封堵。所以,樓層砼澆築完後的必要養護 一般宜 24小時 必須獲得保證,如在實際施工中,由於搶趕工期和澆水將影響彈線及施工人員作業,施工中必須堅持覆蓋麻袋或草包進...