液相色譜有幾種分離型別 各有什麼特點

時間 2021-08-30 11:04:04

1樓:月似當時

1、吸附色譜法

吸附色譜法的固定相為吸附劑,色譜的分離過程是在吸附劑表面進行的,不進入固定相的內部。與氣相色譜不同,流動相(即溶劑)分子也與吸附劑表面發生吸附作用。

在吸附劑表面,樣品分子與流動相分子進行吸附競爭,因此流動相的選擇對分離效果有很大的影響,一般可採用梯度淋洗法來提高色譜分離效率。

在聚合物的分析中,吸附色譜一般用來分離新增劑,如偶氮染料、抗氧化劑、表面活性劑等,也可用於石油烴類的組成分析。

2、分配色譜法

這種色譜的流動相和固定相都是液體,樣品分子在兩個液相之間很快達到平衡分配,利用各組分在兩相中分配係數的差異進行分離,類似於萃取過程。

3、離子交換色譜

離子交換色譜通常用離子交換樹脂作為固定相。一般是樣品離子與固定相離子進行可逆交換,由於各組分離子的交換能力不同,從而達到色譜的分離。

離子交換色譜法是新發展起來的一項現代分析技術,已廣泛用於氨基酸、蛋白質的分析,也適合於某些無機離子(no3-、so42-、cl-等無機陰離子和na+、ca2+、mg2+、k+等無機陽離子)的分離和分析,具有十分重要的作用。

4、凝膠色譜法

凝膠色譜法既適用於水溶液的體系,又適用於有機溶劑的體系。

當所用的洗脫劑為水溶液時,稱為凝膠過濾色譜,其在生物界的應用比較多;採用有機溶劑為洗脫劑時,稱為凝膠滲透色譜,在高分子領域應用較多。

擴充套件資料

液相色譜應用非常廣泛,幾乎遍及定量定性分析的各個領域。

(1)分離混合物

高效液相色譜法只要求樣品能製成溶液,不受樣品揮發性的限制,流動相可選擇的範圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量範圍的物質。

通過與試樣預處理技術相配合,高效液相色譜法所達到的高解析度和高靈敏度,可分離並同時測定性質上十分相近的物質,能夠分離複雜混合物中的微量成分。並且隨著固定相的發展,還可在充分保持生化物質活性的條件下完成對其的分離。

(2)生化分析

由於高效液相色譜法具有高解析度、高靈敏度、速度快、色譜柱可反覆利用,流出組分易收集等優點,因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析、無機分析等各種領域,並已成為解決生化分析問題最有前途的方法。

(3)儀器聯用

高效液相色譜儀與結構儀器的聯用是一個重要的發展方向。高效液相色譜一質譜聯用技術受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯農藥和多核芳烴等。

2樓:

液相色譜按分離機理分為吸附、分配、交換、排阻以及親和五種型別。

利用組分在吸附劑(固定相)上的吸附能力強弱不同而得以分離的方法,稱為吸附色譜法。固定相是固體,目前這種分離模式在液相色譜中用途很小。

利用組分在固定液或者鍵合固定相(固定相)中溶解度不同而達到分離的方法稱為分配色譜法。固定相是塗覆的固定液或者鍵合的固定相,是目前主流的分離模式,涵蓋了目前液相色譜應用範圍的大部。

利用組分在離子交換劑(固定相)上的親和力大小不同而達到分離的方法,稱為離子交換色譜法。該分離模式主要用來分離離子型化合物,正是由於如此,現在離子色譜已經從液相色譜中分離出來,稱為離子色譜。

利用大小不同的分子在多孔固定相中的選擇滲透而達到分離的方法,稱為凝膠色譜法或尺寸排阻色譜法。這個主要用來分離高分子子化合物,比如蛋白、比如聚合物。

利用不同組分與固定相(固定化分子)的高專屬性親和力進行分離的稱為親和色譜法,常用於蛋白質分離。

液相色譜法有幾種型別?在這些型別的應用中,最適宜分離的物質是什麼

3樓:匿名使用者

從色譜分離角度講,分為正相色譜和反相色譜,反相色譜應用較廣,目前大部分方法都是使用反相色譜,可以分離大部分常見物質;正相色譜由於其色譜柱的**及苛刻的使用條件限制了其發展,但在分離異構體,尤其是手性異構體時仍然具有不可替代性。

在正相色譜中,一般採用極性鍵合固定相,矽膠表面鍵合的是極性的有機基團,鍵合相的名稱由鍵合上去的基團而定。最常用的有氰基(-cn)、氨基(-nh2)、二醇基(diol)鍵合相。流動相一般用比鍵合相極性小的非極性或弱極性有機溶劑,如烴類溶劑,或其中加入一定量的極性溶劑(如氯仿、醇、乙腈等),以調節流動相的洗脫強度。

通常用於分離極性化合物。一般認為正相色譜的分離機制屬於分配色譜。組分的分配比k值,隨其極性的增加而增大,但隨流動相中極性調節劑的極性增大(或濃度增大)而降低。

同時,極性鍵合相的極性越大,組分的保留值越大。

該法主要用於分離異構體,極性不同的化合物,特別是用來分離不同型別的化合物。

反相鍵合相色譜法

在反相色譜中,一般採用非極性鍵合固定相,如矽膠-c18h37(簡稱ods或c18)矽膠-苯基等,用強極性的溶劑為流動相,如甲醇/水,乙腈/水,水和無機鹽的緩衝液等。

目前,對於反相色譜的保留機制還沒有一致的看法,大致有兩種觀點:一種認為屬於分配色譜,另一種認為屬於吸附色譜。

分配色譜的作用機制是假設混合溶劑(水+有機溶劑)中極性弱的有機溶劑吸附於非極性烷基配合基表面,組分分子在流動相中與被非極性烷基配合基所吸附的液相中進行分配。吸附色譜的作用機制是把非極性的烷基鍵合相,看作是在矽膠表面上覆蓋了一層鍵合的十八烷基的「分子毛」,這種「分子毛」有強的疏水特性。當用水與有機溶劑所組成的極性溶劑為流動相來分離有機化合物時,一方面,非極性組分分子或組分分子的非極性部分,由於疏溶劑的作用,將會從水中被「擠」出來,與固定相上的疏水烷基之間產生締合作用。

另一方面,被分離物的極性部分受到極性流動相的作用,使它離開固定相,減少保留值,此即解締過程。顯然,這兩種作用力之差,決定了分子在色譜中的保留行為。.

一般地,固定相的烷基配合基或分離分子中非極性部分的表面積越大,或者流動相表面張力及介電常數越大,則締合作用越強,分配比也越大,保留值越大。在反相鍵合相色譜中,極性大的組分先流出,極性小的組分後流出。

高效液相色譜分為幾種型別?各型別的分離原理如何?適用於分離哪些組分?

4樓:費莫恆山媚

不是很明白樓主的意思,你的意思是進了5針嗎?每個都給出保留時間還是一張圖上有5個峰呢?

分離度是計算臨近2峰的,單個峰是沒有辦法說分沒分開的問題的。

如果是5張圖上的話,每張圖都要算對照和臨近峰之間的分離度,而且儘量重複性高。要是是一張圖上的5個峰的話就要算對照品臨近兩峰之間的分離度了。

一般的液相色譜工作站都會自動給出,你可以向以前做過的人諮詢一下應該怎麼設定。

分離度又稱解析度,為了判斷分離物質對色譜柱在色譜柱中的分離情況,常用分離度作為柱的總分離效能指標.用r表示.r等於相鄰色譜峰保留時間之差與兩色譜峰峰寬均值之比.

resolution,r

相鄰兩峰的保留時間之差與平均峰寬的比值。也叫解析度,表示相鄰兩峰的分離程度。r越大,表明相鄰兩組分分離越好。

一般說當r<1時,兩峰有部分重疊;當r=1.0時,分離度可達98%;當r=1.5時,分離度可達99.

7%。通常用r=1.5作為相鄰兩組分已完全分離的標誌。

當r=1時,稱為4σ分離,兩峰基本分離,裸露峰面積為95.4%,內側峰基重疊約2%。r=1.

5時,稱為6σ分離,裸露峰面積為99.7%。r≥1.

5稱為完全分離。《中國藥典》規定r應大於1.5。

分離度計算公式:r=2(tr2-tr1)/(w1+w2)

5樓:

我沒聽說過它有分類……

分離原理不就是在高壓下,固相和流動相不同的分配細說嗎

實用於分離那些吸附性很高,在普通壓力下無法分離的

液相色譜法有幾種型別?它們的保留機理是什麼

6樓:匿名使用者

正相色譜,吸附機理分離親酯性物質;反相色譜,分配機理分離有一定親水性的有機分子;離子色譜,分子篩機理分離陰離子有機化合物或陽離子.

7樓:上海波粒儀器

吸附分配、離子交換、排阻凝膠、手性親和

液相色譜法有幾種型別 保留機理是什麼

8樓:

根據固定相的不同,液相色譜分為液固色譜、液液色譜和鍵合相色譜。應用最廣的是以矽膠為填料的液固色譜和以微矽膠為基質的鍵合相色譜。

根據固定相的形式,液相色譜法可以分為柱色譜法、紙色譜法及薄層色譜法。

按吸附力可分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜和凝膠滲透色譜。

近年來,在液相柱色譜系統中加上高壓液流系統,使流動相在高壓下快速流動,以提高分離效果,因此出現了高效(又稱高壓)液相色譜法。

液相色譜法的分離機理是基於混合物中各組分對兩相親和力的差別。

液相色譜法就是用液體作為流動相的色譜法。1903 年**化學家m.c.

茨維特首先將液相色譜法用於分離葉綠素。氣相色譜不能由色譜圖直接給出未知物的定性結果,而必須由已知標準作對照定性。當無純物質對照時,定性鑑定就很困難,這時需藉助質譜、紅外和化學法等配合。

另外大多數金屬鹽類和熱穩定性差的物質還不能分析。此缺點可高效液相色譜法來克服。

9樓:口袋微店潮韓坊

正相色譜,吸附機理分離親酯性物質;

反相色譜,分配機理分離有一定親水性的有機分子;

離子色譜,分子篩機理分離陰離子有機化合物或陽離子.

希望對你有所幫助,記得采納哦!

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