1樓:符玉蓉亥月
苯甲酸,水楊酸和乙醯水楊酸幾種物質本身具有不同的官能團,並非手性異構體,結構也並不複雜,用正相色譜和反向色譜均能檢出。處於檢驗成本和實用性等多方面考慮,應優先選用反相色譜。
液相色譜有正相和反相之分。正相色譜和反相色譜還有吸附色譜和極性化學鍵鍵合色譜之分。如果採用固定相的極性大於流動相的極性,就稱為正相色譜;如果固定相的極性小於流動相的極性,則稱為反相色譜。
由於極性化合物更容易被極性固定相所保留,所以正相色譜系統一般適用於分離極性化合物,極性小的組分先流出。相反,反相色譜系統一般適用於分離非極性或弱極性化合物,極性大的組分先流出。
反相液相色譜柱效高、分離能力強、保留機理清楚,是液相色譜分離模式中使用最為廣泛的一種。能夠利用反向色譜進行分離的物質應優先考慮反向色譜。
因此在應用上正相色譜用於分離極性較大的物質,如蛋白質、生物鹼等。反相色譜多用於分離極性較小的物質,在流動相的選擇上,反相色譜的優勢更大,在實際工作中反相色譜的應用更為廣泛。
2樓:匿名使用者
能使中性化合物和極性化合物在一根色譜柱中得到分離。
適用於多種基體中的多類不同性質化合物的測定和分離。
保留時間可以用分子的疏水性進行描述和解釋。
所用高純度的水、甲醇和乙腈等溶劑**便宜、實用。
選擇性可通過用緩衝溶液進行調節(通過調節ph值來調節離子強度和膠團粒子大小等等),以實現最佳分離。
在液相色譜法中,為什麼可分為正相色譜和反相色譜?各有什麼含義?
3樓:直到遇見你天蠍
正相色譜基本上可以被看做是液固吸附色譜,其柱填料是吸附劑,其表面上分佈有活性吸附位點,溶劑和溶質分子均能被吸附於活性位點上。由於相互作用力有大有小,溶劑分子與溶質分子、溶質分子相互之間又存在競爭吸附,從而造成了在柱內保留時間的差異,使不同物質得到分離。
應用特點:正相色譜一般用來分離中性化合物和離子(或可電離的)化合物,而且以中性樣品為主。適於分離樣品如下:
①對於反相色譜法很難分離的異構體,可以採用以矽膠為固定相的正相色譜分離分析;
②根據被分離樣品極性差別進行族類分離;
③易於水解樣品的分離分析;
④分離分析高脂溶性樣品,其在極性有機溶劑中溶解度很小;
⑤正相色譜也可以用於異構體分離(包括幾何異構體和光學異構體)。
2、流動相極性大於固定相極性的情況,稱為反相色譜。非極性鍵合相色譜可作反相色譜。在現代液相色譜中應用最廣泛,現代液相色譜分析工作的70%以上是在非極性鍵合固定相上進行的。
反相介質效能穩定。分離效率高。
4樓:貊蕊泥丁
反相還是正相,是根據流動相相對於固定相的極性而言的。
流動相極性強於固定相的,稱作反相色譜;流動相極性弱於固定相的,稱作正相色譜。
反相色譜流動相的極性強,容易帶著極性分子走,而留下非極性分子。這主要用於非極性樣品的分離。常用的高壓液相色譜都是這種,也有人喜歡說反相液相色譜,其實是一個意思。
正相色譜固定相極性強,容易把極性分子留下,故主要用於極性樣品的分離。如離子色譜。
5樓:偶梅花象婷
採用正相及反相色譜是為了降低固定液在流動相中的溶解度從而避免固定液的流失。當使用親水性固定液時常採用疏水性流動相,及流動相的極性小於固定液的極性,成為正相液色譜,反之則是反相液液色譜。
6樓:斐素芹箕未
根據樣品的極性分的,正相色譜:固定相極性大於流動相極性。
反相色譜:固定相極性小於流動相極性。
什麼是正相色譜法和反相色譜法?它們分別適宜分離何種極性的物質?
什麼是正相色譜和液相色譜,在應用上有什麼特點?
7樓:信必鑫服務平臺
液相色譜有正相和反相之分。如果採用極性固定相和相對非極性流動相,就稱為正相;如果採用相對非極性固定相和極性流動相,則稱為反相。由於極性化合物更容易被極性固定相所保留,所以正相液-液色譜系統一般可用於分離極性化合物。
相反,反相色譜系統一般可用於分離非極性或弱極性化合物。正相色譜的流出順序是極性小的先流出,極性大的後流出;反相色譜的流出順序正好相反。
高效液相色譜特點:
①高壓:流動相為液體,流經色譜柱時,受到的阻力較大,為了能迅速通過色譜柱,必須對載液加高壓。
②高效:分離效能高。可選擇固定相和流動相以達到最佳分離效果,比工業精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。
③高靈敏度:紫外檢測器可達,進樣量在μl數量級。
④應用範圍廣:百分之七十以上的有機化合物可用高效液相色譜分析,特別是高沸點、大分子、強極性、熱穩定性差化合物的分離分析,顯示出優勢。
⑤分析速度快、載液流速快:較經典液體色譜法速度快得多,通常分析一個樣品在15~30分鐘,有些樣品甚至在5分鐘內即可完成,一般小於1小時。
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