1樓：匿名使用者
第一個一般在94－95度左右，叫做變性，就是通過加熱開啟雙鏈。
第二個溫度點叫做退火，根據引物的tm算出，一般比tm低5度，有利於引物的結合。
第三個溫度叫做延伸，一般採用72度。是引物結合後dna聚合酶按照模板合成新的鏈。一分鐘一千個鹼基對。
如此迴圈。
現在很多pcr都採用2部法，由於採用了不同的dna聚合酶（最佳溫度60度）。這樣退火和延伸採用一個溫度。
2樓：海上小哥
你所說的三個溫度變化即變性、退火和延伸過程。變性過程是dna雙鏈開啟變為單鏈的過程，隨後溫度降低至退火溫度，使特異性的引物與模板發生結合，最後進入延伸過程，taq酶在此溫度下利用單脫氧核苷酸沿著dna鏈進行合成，並最終形成2個相同的pcr產物。其實目前有的試劑盒已經可以進行2個溫度變化了，退火和延伸都是用60℃，在熒光定量pcr方面是用較多。
3樓：馮雨凝
1、變性：加熱使模板dna在高溫下（94-95℃）變性，雙鏈間的氫鍵斷裂而形成兩條單鏈，即變性階段。
2、退火：在體系溫度降至37-65℃，模板dna與引物按鹼基配對原則互補結合，使引物與模板鏈3』端結合，形成部分雙鏈dna，即退火階段。
3、延伸：體系反應溫度升至中溫72℃，耐熱dna聚合酶以單鏈dna為模板，在引物的引導下，利用反應混合物中的4種脫氧核苷三磷酸（dntp），按5』到3』方向複製出互補dna，即引物的延伸階段。
4樓：寒風斷雪
這叫三步法，也有兩個溫度的。
一般的都是變性，退火，延伸，當退火溫度達到65度以上的時候即快接近延伸溫度的時候採用兩步法，看看pcr說明書就可以明白了。
要想明白原因的話，就不能不好好理解原理。首先是雙鏈的分開，即變性。退火溫度是引物與模板相結合的過程，一般不超過tm-5度，一般是50-55度，pcr的時候調節溫度獲取特異性好的條帶就ok了。
延伸就不用講了
為什麼在pcr反應過程中，使用三個不同的溫度變化
5樓：匿名使用者
因為有變性，退火，擴增三個不同的反應階段，而這三個反應需要的最適溫度不同。
1 pcr反應的3個主要過程是什麼，對應的最適溫度應該是多少
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