1樓:匿名使用者
一、一般的操作步驟:
1). 首先對流動相進行過濾,根據需要選擇不同的濾膜,一般為有機系和水系,常用的孔徑為和。
2). 對抽濾後的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。
3). 正常情況下,儀器首先用甲醇。
沖洗10-20分鐘,然後再進入測試用流動相(如流動相為緩衝試劑,則要二次重蒸水沖洗10-20分鐘,直至色譜柱。
中有機相沖淨為止) 。
4). 一般情況下,流動相沖洗20-30分鐘後,儀器方可穩定,最重要的是儀器基線走後,方可進樣測試。
5). 同時進兩針標樣,將其結果相比較,其結果的比值在之間後,就可以正式進行樣品的測試了。
6). 樣品測試結束後,就要進行色譜儀及色譜柱的清洗和維護。如流動相為緩衝試劑,同樣也要用重蒸水清洗10-20分鐘,方可用有機相進行保護,否則,有損色譜柱。
7). 關機時,先關計算機,再關液相色譜。
8). 填寫登記本,由負責人簽字。
二、 注意事項:
1). 流動相均需色譜純度,水用20m的去離子水。
脫氣後的流動相要小心振動儘量不引起氣泡。
2). 柱子是非常脆弱的,第一次做的方法,先不要讓液體過柱子。
3). 所有過柱子的液體均需嚴格的過濾。
4). 壓力不能太大,最好不要超過150kgf/cm2 .
5). 因為緩衝試劑遇有機溶劑,會結晶,有損色譜柱,所以,每次由有機相變流動相或流動相變有機相均需用蒸餾水。清洗。
2樓:帳號已登出
緩衝試劑遇有機溶劑,會結晶,有損色譜柱,所以,每次由有機相變流動相或流動相變有機相均需用蒸餾水清洗。
高效液相色譜法對測試樣品有什麼要求
3樓:網友
如果高效液相色譜儀的檢測器是紫外檢測器的話,首先要保證樣品具有紫外吸收,如內果沒有紫外吸收的。
容話可選擇螢光檢測器、蒸發光檢測器等等,總而言之需要你的樣品主成分在檢測器上有響應訊號。
樣品在進行檢測前還要配製成一定濃度的溶液(配製溶液的時候需根據樣品的溶解度情況選擇合適的溶劑,為了減小溶劑峰,通常使用流動相作為溶劑,樣品溶液的濃度一般配製成10ug/ml左右的就可以),如果樣品溶解很好且沒有其他雜質,可直接吸取樣品溶液進樣,如果樣品中還有其他成分,比如測定口服藥物製劑中某成分的含量,往往口服藥物製劑中有其他輔料,樣品溶液在進樣前還要進行一下過濾(通常採用或的針頭式過濾器)。
高效液相色譜儀在使用時應注意什麼
4樓:上海靈華儀器
氣相色譜儀 在石油、化工、生物化學、醫藥衛生、食品工業、環保等方面應用很廣。它除用於定量和定性分析外,還能測定樣品在固定相上的分配係數、活度係數、分子量和比表面積等物理化學常數。一種對混合氣體中各組成分進行分析檢測的儀器。
氣體工業名詞術語。一種色譜分析儀器。由載氣帶入,通過對欲檢測混合物中組分有不同保留效能的 氣相色譜儀色譜柱,使各組分分離,依次匯入檢測器,以得到各組分的檢測訊號。
按照匯入檢測器的先後次序,經過對比,可以區別出是什麼組分,根據峰高度或峰面積可以計算出各組分含量。通常採用的檢測器有:熱導檢測…
5樓:千冥靚傲
1、在用紫外吸收檢測器時,所用流動相應符合紫外分光光度法項下對溶劑的要求。
2、各品種項下規定的條件除固定相種類、流動相組分、檢測器型別不得任意改變外,其餘如色譜柱內徑、長度、固定相牌號、載體粒度、流動相流速、混合流動相各組分的比例、柱溫、進樣量、檢測器的靈敏度等,均可適當改變。
3、一般色譜圖約於20分鐘內記錄完畢,以適應具體品種並達到系統適用性試驗的要求。
4、如所用流動相為含鹽流動相,反相色譜柱使用後,先用水或低濃度甲醇水(如5%甲醇水溶液),再用甲醇沖洗。
5、不要在高溫下長時間使用矽膠鍵合相色譜柱。
6、流動相應選用色譜純試劑、高純水或雙蒸水,酸鹼液及緩衝液需經過濾後使用,過濾時注意區分水系膜和油系膜的使用範圍。
7、水相流動相需經常更換(一般不超過2天),防止長菌變質。
高效液相色譜法測定中藥含量採用的方法有哪些?
6樓:網友
主要是外標法紫外檢測器測定。
高效液相色譜儀分析樣品的步驟有哪些?
7樓:網友
一、預處理:
1、固體樣品:含水較低,粉碎過篩。含水量較高,取使用部分烘乾後,粉碎過篩。
2、液體樣品:攪拌混合均勻。
3、特殊樣品:根據實驗要求進行特殊處理。
二、提取:1、浸提法(固-液萃取法):將樣品浸泡在溶劑中,把固體樣品中的某些組分浸出。
2、萃取法(液-液萃取法):利用被提取組分在互不相溶的兩種溶劑中分配係數的不同實現分離。
三、淨化:1、萃取法:適用於液體樣品,少量多次。
2、化學法:通過使雜質或待測物發生化學反應而改變其溶解性,使其與原體系分離。
3、層析法:利用混合物中各組分理化性質的不同,使各組分在支援物上的移動速度不同,而將各組分分離。
四、濃縮:1、常壓濃縮:通過公升高溫度,將溶劑由液態轉化成氣態被抽走,從而達到濃縮目的。適用於揮發性和沸點相對較低的樣品。
2、減壓濃縮:通過抽真空,使容器內產生負壓,在不改變樣品化學性質的前提下降低樣品的沸點,使一些高溫下化學性質不穩定或沸點高的溶劑在低溫下由液態轉化成氣態被抽走,從而達到濃縮目的。
3、冷凍乾燥:冷凍的同時抽真空減壓,使溶劑昇華。適用於生物活性樣品。
4、氮吹儀濃縮:採用氮氣對加熱樣品進行吹掃,使樣品迅速濃縮,達到快速分離純化的效果。適用於農殘檢測和製藥行業等樣品的批量處理。
做高效液相色譜時應注意哪些問題?
8樓:網友
去 儀器色譜網 ,小木蟲,丁香園,裡面論壇都說的很好的。
9樓:網友
這個問題涉及的問題很多,細節問題,很難說清楚,建議你去「生化色譜網」去看看,那裡非常專業。
中藥材或製劑高效液相色譜測定的注意事項有哪些
10樓:夕哲仝元槐
如果你對hplc方法比較熟悉,只是沒有做中藥材和製劑的經驗,需要注意的主要是樣品的前處理。以反相為例:
1.中藥材的成分比較複雜,首先是提取,採用適合的溶劑,超聲、迴流等,使目標物有較高的**率;其次是要將與目標物極性差異較大的雜質除掉,可以用萃取、過柱、固相萃取等;然後濃縮或稀釋到適合的濃度,經過濾或離心除去機械雜質。
2.製劑一般已經經過了提取,雜質要少一些,但可能增加了輔料,所以還要考慮除去輔料的干擾。
中藥材或製劑高效液相色譜測定的注意事項有哪些
11樓:色譜世界
建議你去「生化色譜網」去問問看吧,這個**在色譜方面非常專業。
12樓:網友
1,3樓的廣告看了就煩,建議樓主選擇推薦的答案一部藥典上就有寫的很清楚了。
一般來說,嚴格按照藥典上說的來處理樣品就不會有什麼問題了中藥,就是前處理太麻煩了。
中藥製劑是什麼概念
樹琇祖春 中藥製劑系根據 中華人民共和國藥典 衛生部 藥品標準 中藥成方製劑 製劑規範 等規定的處方,將中藥加工或提取後製成具有一定規格,可以直接用於防病治病的一類藥品。中藥製劑包括中藥成方製劑 中成藥 協定處方製劑及單味藥製劑等。當代的成方製劑與中成藥品種已達到10000餘種,醫院製劑亦約有150...
液相色譜柱嚴重拖尾該如何處理,「高效液相色譜法」主峰拖尾怎麼解決?
出峰快結束的時候又出來一個不全的峰,對於這種情況,很有可能是你的柱子不乾淨,才用梯度洗脫法沖洗柱子。單元泵的話,用幾個不同比例的流動相沖洗柱子,至基線穩定。色譜柱走出來的峰型拖尾很嚴重,這個有好幾種原因 流動相的比例,如甲醇 水的比例不一樣,出峰時間和拖尾程度不一樣的,還有你的柱型是否和檢測物質匹配...
中藥製劑 的名詞解釋,藥劑學裡製劑的名詞解釋
中藥製劑總論 中藥製劑系根據 中華人民共和國藥典 衛生部 藥品標準 中藥成方製劑 製劑規範 等規定的處方,將中藥加工或提取後製成具有一定規格,可以直接用於防病治病的一類藥品。中藥製劑包括中藥成方製劑 中成藥 協定處方製劑及單味藥製劑等。當代的成方製劑與中成藥品種已達到10000餘種,醫院製劑亦約有1...