1樓：匡雅霜
怎樣pcr和這個是啥片段沒什麼關係。
你要先看你所用的酶的說明書，上面有該酶的熱啟動溫度，變性溫度，延伸溫度等等，不同的酶都是不一樣的。
如果酶的延伸速度是一分鐘1kb，那麼你就設3.5分鐘，如果是半分鐘1kb，就設2分鐘，就這樣。
退火溫度是看你設計的引物，你把引物放到設計軟體上看一看，調整一下buffer的離子濃度，看看退火溫度是多少。
就可以了。
2樓：
這麼長的pcr產物需要用特殊的taq酶（如takara的la taq，不知道這個酶是否換生產），普通的taq酶一般延伸不到這麼長。你需要根據taq酶的延伸速度計算延伸時間（taq酶的延伸速度一般是幾百bp/min，你可以查查你用的taq酶的延伸速度），延伸時間=產物長度/延伸速度，然後留一些冗餘。3400bp至少需要延伸4-5min左右。
3樓：匿名使用者
延伸時間與所用的聚合酶有關，並且你的片段很大，最好選擇可以用來擴增大片段的聚合酶，如果要有高保真度，推薦fastpfu
影響pcr反應效率的因素有哪些？如何有效地提高pcr反應的效率？
4樓：閉曄旅爾容
一、溫度迴圈引數
二、引物引物設計
三、dna聚合酶
四、mg2+
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