1樓：封琴瑟煙雨冢
基因工程的上游工程主要是目的基因的製取和無性繁殖。具體地說是從生物體的組織、器官或細胞製取目的基因或者人工合成目的基因，將目的基因與載體的dna拼接，使重組體分子匯入受體細胞，篩選和進行無性繁殖。這個過程可以稱為基因克隆(gene cloning)。
基因克隆是70年代發展起來的一項具有革命性的研究技術，可概括為∶分、切、連、轉、選。最終目的在於通過相應技術手段，將目的基因匯入寄主細胞，在宿主細胞內目的基因被大量的複製。
基因是細胞內dna分子上具有遺傳效應的特定核苷酸序列的總稱，是具有遺傳效應的dna分子片段。基因控制蛋白質合成，是不同物種以及同一物種的不同個體表現出不同的性狀的根本原因，即所謂"種瓜得瓜，種豆得豆"，"一母生九子，九子各不同"。基因通過dna複製及細胞**把遺傳資訊傳遞給下一代，並通過控制蛋白質的合成使遺傳資訊得到表達。
「分」是指分離製備合格的待操作的dna，包括作為運載體的dna和欲克隆的目的dna。"切"是指用序列特異的限制性內切酶切開載體dna，或者切出目的基因；"連"是指用dna連線酶將目的dna同載體dna連線起來，形成重組的dna分子；"轉"是指通過特殊的方法將重組的dna分子送入宿主細胞中進行復制和擴增；"選"則是從宿主群體中挑選出攜帶有重組dna分子的個體。基因工程技術的兩個最基本的特點是分子水平上的操作和細胞水平上的表達，而分子水平上的操作即是體外重組的過程，實際上是利用工具酶對dna分子進行"外科手術"。
2樓：中國農業出版社
用人工方法取得目的基因的適宜載體，即質粒（一種環狀雙鏈dna）或病毒。
基因克隆載體必須具備三個條件，具有能使外源dn**段插入的克隆位點；能攜帶外源dna進入受體細胞，或遊離在細胞質中進行自我複製，或整合到染色體dna上隨染色體dna的複製而複製；必須具有選擇標記，以便篩選承載外源dna的受體細胞。
目前原核受體細胞的載體主要有細菌質粒（鬆弛型）和λ噬菌體兩類，真核細胞受體的載體主要有sv40病毒（用於動物轉化）和ti質粒（用於植物轉化）。
基因工程中常用哪兩類克隆載體？舉例說明理想質粒載體應具備什麼條件？
3樓：盧勳沃慨
克隆載體（cloning
vector）：通常採用從病毒、質粒或高等生物細胞中獲取的dna作為克隆載體，在載體上插入合適大小的外源dn**段，並注意不能破壞載體的自我複製性質。將重組後的載體引入到宿主細胞中，並在宿主細胞中大量繁殖。
常見的載體有質粒，噬菌粒，酵母人工染色體。
基因克隆的基本步驟有哪些
4樓：莫彷徨
選擇目的基因,並設計相應引物；
用引物pcr擴增目的基因片段；
選擇合適（抗性標記、酶切位點等）的克隆載體（為了保真擴增）,並將pcr片段連線入克隆載體中；（一般用taq酶的pcr產物在末尾會自帶一個a,可在solution 1作用下與兩端各帶一個t的線性t載體直接相連）
將連線產物轉化入感受態大腸桿菌,使之在含有抗生素的培養基上生長擴增；
從大腸桿菌中提取質粒（即前面的連線產物）,酶切鑑定和測序鑑定均無誤後將目的基因片段切下並與新的表達載體連線,然後再次轉化入大腸桿菌中擴增,再提質粒,即得到想要的目的基因片段克隆.
分子克隆的載體應具備哪些條件
5樓：阿魯巴星人
必備：1.複製
起始位點：可在工具細胞內進行復制
2.多克隆位點：可插入內外源基因容
可選：3.篩選基因：如抗性或顯色基因，可用於轉化菌種的篩選《基因工程》上的說法是：
1.自主複製性
2.可擴增性
3.可轉移性
4.不相容性
6樓：匿名使用者
自我複製的能力，標記基因
基因工程的克隆載體有哪些研究？
7樓：中國農業出版社
基因工程的發展與克隆抄載bai體的構建密切相關，至今已du構建了大量克隆載體zhi。以構建克隆載體的材料分為質dao粒載體系統、病毒（噬菌體）載體系統、質粒同病毒（噬菌體）dna組成的載體系統、質粒同染色體dn**段組成的基因整合載體系統以及葉綠體dna或線粒體dna構建的載體系統。
以載體的用途分為通用克隆載體、大片段dna克隆載體、cdna克隆載體和表達克隆載體等等。
克隆載體有的用於大腸桿菌、有的用於植物、有的用於動物。目前和今後一段時期內將會重點發展適用於真核生物的強表達載體和基因定位整合的克隆載體。
基因工程中常用哪兩類克隆載體？舉例說明理想質粒載體應具備什麼條件？
8樓：匿名使用者
質粒載體、bai噬菌體載體
理想du質粒載
體條件：
1. 具zhi有複製起始dao點
2. 具有兩種以上易被檢測的內選擇性標記容3. 在選擇標記上具有多種限制酶的單一切點4. 具有儘可能小的相對分子質量
5. 應屬於鬆弛複製型
6. 應為非傳遞性質粒
理想值粒載體例子：
（一） pbr22質粒載體：
1. 相對分子質量較小
2. 具有一個複製起始點，屬鬆弛複製性載體3. 含四環素抗性和氨苄青黴素抗性基因，便於作為選擇性標記4. 有24種單一限制酶識別位點，有利於檢測重組轉化子（二） puc質粒載體
1. 具有很小的相對分子質量和很高的拷貝數2. 適合用於組織化學方法檢測重組體
3. 具有多克隆位點mcs區段。可使具兩種不同粘性末端的多種外源dn**段無需藉助其它操作而直接定向克隆到puc質粒載體上。
基因克隆的載體有哪些基本特徵
9樓：匿名使用者
基因載體是攜帶目的基因、實現目的基因無性繁殖或表達有意義的蛋白質所採用的dna分子。內分為克隆載體和容表達載體。可用做基因載體的有：
質粒dan、噬菌體dna和病毒dna。克隆載體應具備以下基本特徵：自我複製能力、具有篩選標誌基因和多個限制性核酸內切酶的單一位點等。
表達載體除具有以上特徵外，還應具有啟動子等轉錄調控序列、適當的翻譯控制序列、合理設計的多克隆位點等。
10樓：
1.要有可轉移性 已進入宿主細胞
2.要有自主複製或者是整
合功能 能攜帶目的基版因一起穩定複製權或表達3.要是足夠大的裝載量 如plasmid 15kb yac 400kb
4.要有合適的篩選標記 便於篩選
5.有合適的多克隆位點 便於目的基因的插入6.要足夠安全
11樓：匿名使用者
1.必須大小合適，復否則影響複製制效率。
2.必須能夠自主複製。
3.必須要有很多限制酶的單一位點，現在的人工載體都含有所謂的多克隆位點。
4.要有一合適的可調控的啟動子和增強子，方便基因表達與調控。
5.必須要有合適的選擇性標記，即能夠證明載體確實已經匯入，並證明載體確實插入了目的基因。
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