1樓：歷竹時棋
快速製作斜面培養基方法
製作培養基斜面是製備菌種不可缺少的一步，傳統的方法是將試管每10支為一組紮成一捆，高壓滅菌後，一支一支地擺成斜面，操作比較煩瑣，佔用面積又多，造成諸多不便。我們在實踐中摸索出一種簡捷快速製備斜面培養基的方法，現介紹如下：
1．將膠合板截成長18釐米(與試管長度相等或略短)、寬9釐米(比並排5支試管直徑的總和略窄)的小塊備用。
2．在並排5支試管上面平置截好的膠合板，再在膠合板上面並排放5支試管，然後將試管的上、下端分別用牛皮紙包好，用線紮緊，使膠合板兩側的試管保持平行，置高壓鍋中滅菌。
3．高壓滅菌後，經自然冷卻，待氣壓降至零時，將高壓鍋的鍋蓋開啟點，當棉塞水分充分蒸發後取出，不用拆捆，直接擺成斜面。大量制斜面時，既快捷又很少佔用空間，非常方便，還便於保溫，減緩凝結速度，充分吸收遊離水分。
4．如需將斜面培養基儲存一段時間，可在滅菌前將聚丙烯塑料袋套在試管外並紮緊袋口，滅菌後取出，直接擺成斜面，可防止水分蒸發。
吉林省梨樹市農村**中專，黎九賢，郭煥富，於愛紅
摘自於2023年第7期《農村實用科技》
2樓：朱理事
培養基的配置應該注意的幾大步驟：
1、常用玻璃儀器的準備製備培養基所用的吸管、錐形瓶、毛細吸管、平皿等玻璃儀器用前要用肥皂水洗刷後用清水沖洗乾淨，晾乾後備用。
（1）平皿用紙或布包好，或裝在金屬盒內，於121℃高壓蒸汽菌3min後烘乾，備用。
（2）試管管口用棉花塞或矽氟塑料試管塞塞好，再用布或報紙包紮好，121℃高壓蒸汽滅菌20℃後烘乾，備用。
（3）吸管及滴管先用少許棉花塞於吸口端（防止汙染物吸出，或橡皮帽內的氣體汙染），然後用紙包後或裝入金屬吸管筒內，於121℃高壓蒸汽滅菌20min後烘乾，備用。其他玻璃器皿均應按上法處理，也應裝金屬筒內160℃乾熱滅菌2h後，備用。
2、培養基的製備及儲存
（1）溶化：一般應放在玻璃器皿或搪瓷齊內。加入蒸餾水，隔水加熱以促其溶解，加熱時應經常攪拌，防止焦結，待其溶解後補足水分。
在使用乾燥培養基時，先將蒸餾水按定量加入容器中，然後稱取一定量培養基幹粉放入水中，靜置10—15min，攪拌，振盪，或延長時間以促進溶解，一般不要熱，必要時加熱，但時間不宜過長，溫度不宜過高，避免某些營養成分被破壞。
（2）校正酸鹼度（調節ph）：培養基必須有適當的ph。因此測定ph是培養基配製過程中的重要步驟之一，測定ph的標準溫度為25士2℃。
調節ph可用無菌的1mol/l氫氧化鈉溶液或10%碳酸鈉溶液、1mol/l鹽酸溶液。當調節緩衝液的ph時，宜用6mol/l磷酸或10mol/l氫氧化鉀溶液。滅菌後的ph會比滅菌前的ph升高或降低，一般高壓滅菌前培養基的ph會比最終ph調高0.
2左右，滅菌後基本合適。因此對培養基、緩衝液、試劑在滅菌前後的ph均進行測定，並記下每次ph的測定結果，有助於積累資料考察每種培養基、緩衝液、試劑對滅菌程式的耐受性，從而指導滅菌前ph的調節。乾燥培養基一般已校正過ph，用時也必須再驗證。
測定時，一般用指示劑滴入培養基觀察其顏色的變化，或用ph計校正，如與所需ph不符，可用以上的酸或鹼液加以校正。調整ph後要加熱過濾，使培養基澄清。( 更多質量檢測、分析測試、化學計量、標準物質相關技術資料請參考中國標準物質 www.
rmhot.com)
（3）培養基的分裝：大批量配製時使用的自動分配器須經校準和確認。每次使用前後，均要對分配器的管道系統進行沖洗，在分裝無菌培養基前，則要採用無菌矽膠管。
固體培養基一般分裝在250ml、500ml錐形瓶中，高壓滅菌後根據需要分裝平皿或試管。
平皿：傾注平皿，應在無菌室中放置3—4h，如用塑料平皿須在35℃培養箱 中倒置30—60min。讓水蒸汽自然蒸發。
斜面：製備低層斜面分裝於試管，約佔容積1/5，滅菌後趁熱斜放在細玻璃棒和木杆上，使成斜度，分裝使注意管口和瓶塞上勿沾有培養基，如沾有培養基應用布抹去，以避免汙染。
高層斜面：製備高層斜面分裝於試管，約佔試管容積的1/3，滅菌後趁熱放置成高層短斜面，待其凝固後應用。
分裝好的培養基或緩衝液等及時密封后必須在配製當天（2h內最佳）進行滅菌處理。液體、半固體培養基一般在高壓滅前分裝，約裝試管容積的1/3，在滅菌後還要加其他成分的液體、半固體培養基，滅菌後再分裝於滅菌試管或錐形瓶中。
培養基的滅菌：培養基的滅菌多采用高壓蒸汽滅菌，各種培養基的滅菌時間和壓力，按其成分不同而定。普通培養基採用121℃、103.
42kpa滅菌15min，但容器和裝量較大時，應延長至20min。含糖培養基115℃、68.85kpa滅菌30min。
含糖、血清、 雞蛋等培養基可用流動蒸汽及血清凝固器80—100℃、30min，連續3d，間歇滅菌。血清或組織液，採用低熱56—58水浴1h，連續5—6d滅菌，一些遇高溫即被破壞的物質如尿素、腹水等，可用細菌過濾器，過濾除菌。高壓滅菌應嚴格按照操作規程執行，必須逐漸加熱，徹底排除滅菌器內的空氣，再逐漸升壓保持預定的壓力和時間，達到全部殺滅微生物。
以上的滅菌時間和溫度要經過驗證確認，如不同型別培養基混合一起滅菌時宜採用115℃、68.85kpa滅菌30min為好。
通過無菌技術為測試製備的每一批培養基其ph在放冷至室溫（25°）後，都應測定。一個扁平的ph計用於培養基表面ph值的測定，浸入式的ph計用於液體的測定。各**商提供的培養基的ph應該在規定的±0.
2的範圍內，除非通過驗證得到更寬的範圍
注意：按配方計算培養基中各種成分的用量→稱量,（一般動作要迅速一些,因為其中可能有些成分容易吸潮）→溶化（將稱好的各種成分溶解在水中,如果是固體培養基,需要使用凝固劑,如瓊脂等,熔化時,注意攪拌,防止糊底）→調ph→滅菌（高壓蒸汽滅菌）→倒平板
1）確認培養基的成分,並精確稱量；
2）加入各個成分的順序；
3）準確調ph；
4) 適當的滅菌方法；
5）無菌條件下分裝.
3樓：果實課堂
製備培養基中有哪些需要注意的點呢
4樓：哈靈培養基廠家
關於培養基配製，當然是注意濃度配比不要搞錯，很多培養基的加料順序有講究,否則會有沉澱產生，有些培養基會有不溶物質,分裝前應搖勻,
不要忘了調節ph值（一般細菌都需要,酵母可能自然ph就行,不過不一定）,加熱溶解時儘量不要煮沸,會損失營養物質.
在配製培養基的操作過程中應該注意些什麼問題？為什麼
5樓：邂逅
1、培養基配方的選定
同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此，除所用的是標準方法，應嚴格按其規定進行配製外，一般均應儘量收集有關資料，加以比較核對，再依據自己的使用目的，加以選用，記錄其**。
2、培養基的製備記錄
每次製備培養基均應有記錄，包括培養基名稱，配方及其**，和各種成份的牌號，最終ph值、消毒的溫度和時間製備的日期和製備者等，記錄應複製一份，原記錄儲存備查，複製記錄隨制好的培養基一同存放、以防發生混亂。
3、培養基成分的稱取
培養基的各種成分必須精確稱取並要注意防止錯亂，最好一次完成，不要中斷。可將配方置於傍側，每稱完一種成分即在配方面軍做出記號，並將所需稱取的藥品一次取齊，置於左側，每種稱取完畢後，即移放於右側。完全稱取完畢後，還應進行一次檢查。
4、培養基各成份的混合和溶化
培養基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋，以防有微量銅或鐵混入培養基中，使細菌不易生長。最好使用不鏽鋼萵加熱溶化，可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。
在鍋中溶化時、可先用溫水加熱並隨時擾動、以防焦化、如發現有焦化現象、該培養基即不能使用，應重新制備。待大部分固體成分溶化後，再用較小火力使所有成分完全溶化，迄至煮沸。如為瓊脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然後將兩溶液充分混合。
在加熱溶化過程中，因蒸發而丟失的水分，最後必須加以補足。
5、培養基ph的初步調正
因培養基在加熱消毒過程中、ph會有所變化，培養基各成分完全溶解後，應進行ph的初步調正。例如，牛肉浸液約可降低ph0.2，而腸浸液ph卻會有顯著的升高。
因此，對這個步驟，操作者應隨時注意探索經驗、以期能掌握培養基的最終ph，保證培養基的質量。ph調整後，還應將培養基煮沸數分鐘，以利培養基沉澱物的析出。
6、培養基的過濾澄清
液體培養基必須絕對澄清，瓊脂培養基也應透明無顯著沉澱，因此 ，須要採用過濾或其它澄清方法以達到此項要求。一般液體培養基可用濾紙過濾法，濾紙應摺疊成摺扇或漏斗形，以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。
瓊脂培養基可用清潔的白色薄絨布趁熱過濾。亦可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過濾。新制肉、肝、血和土豆等浸液時、則須先用絨布將碎渣濾去，再用濾紙反覆過濾。
如過濾法不能達到澄清要求、則須用蛋清澄清法。即將冷卻至55~60°c的培養基放入大的三角燒瓶內，裝入量不得超過燒瓶容量的1/2，每1000ml培養基加入1~2個雞蛋的蛋白，強力振搖3~5分鐘，置高壓蒸汽滅菌器中、121°c加熱20分鐘、取出趁熱以絨布過濾即可。
7、培養基的分裝
培養基的分裝，應按使用的目的和要求，分裝於試管、燒瓶等適當容器內。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防溼紙的棉塞封堵，其外還須用防水紙包紮（現試管一般多有用螺旋蓋者）。
分裝時最好能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養基時，分裝量應以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當。分裝容器應預先清洗乾淨並經幹烤消毒，以利於培養基的徹底滅菌。
每批培養基應另外分裝20ml培養基於一小玻璃瓶中，隨該批培養基同時滅菌，以為測定該批培養基最終ph之用。
8、培養基的滅菌
一般培養基可採用121°c高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。在各種培養基製備方法中，如無特殊規定，即可用此法滅菌。
某些畏熱成分，如糖類，應另行配成20%或更高的濃液，以過濾或間歇滅菌法消毒，以後再用無菌操作技術、定量加於培養基。明膠培養基亦應用較低溫度滅菌。血液、體液和抗生素等則應以無菌操作技術抽取和加入於經冷卻約50°c左右的培養基中。
瓊脂斜面培養基應在滅菌後立即取出，冷至55℃-60℃時，擺置成適當斜面，待其自然凝固。
9、培養基的質量測試
每批培養基製備好以後，應仔細檢查一遍，如發現破裂、水分浸入、色澤異常、棉塞被培養基沾染等、均應挑出棄去。並測定其最終ph。
將全部培養基放入36±1°c恆溫箱培養過夜，如發現有菌生長，即棄去。
用有關的標準菌株接種1~2管或瓶培養基，培養24~48小時，如無菌生長或生長不好。應追查原因並重復接種一次，如結果仍同前，則該批培養基即應棄去，不能使用。
10、培養基的儲存
培養基應存放於冷暗處，最好能放於普通冰箱內。放置時間不宜超過一週，傾注的平板培養基不宜超過3天。每批培養基均必須附有該批培養基製備記錄副頁或明顯標籤。
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