1樓:匿名使用者
我分析原因是過硫酸胺失效,過硫酸氨最好是先用現配,如果怕麻煩而且跑膠的頻率很高的話,那麼用完之後ap要放在4℃儲存,一週之後必須新配。另外可以適當的增加temed的量,從5μl提高到8μl並無大礙。
如你所說,是不是就是ap失效呢,還有,我強烈建議你複查一邊濃縮膠,分離膠各各buffer的組分是否配製有誤,特別是ph,另外,現在氣溫上升,原來冬天配製的溶液的ph和現在可能會相差很多,建議複查,如果ph不對,重新配過。一般情況下,對於ph有要求的溶液,季節更換的時候,基本要重新配過的。原來以貯存液形式存在的溶液,在稀釋用作工作液的時候,也要特別注意ph
2樓:***
分離膠30分鐘左右凝固有點慢,可能ap配製時間過長。多加點試試。
3樓:匿名使用者
1,多加過硫酸銨試試
2,多加點temed,可加速凝固
3,配好膠後放在溫箱裡凝的快些,環境溫度低會影響凝的速度。我在冬天會灌好膠後放在培養箱裡,一般很快就凝了,可以提高效率,一天最多可以跑5次。
最後,經常出現濃縮膠凝但不成形,非常粘,這是因為c液(濃縮膠緩衝液)的ph值不對,重新配製c液
做了四年蛋白電泳實驗,不凝是是最初發生的問題,基本按以上思路解決的,以後再沒遇見過,但也不排除我能力範圍之外的沒想到的因素
4樓:
過硫酸氨最好現配,4度儲存最多7天
5樓:吉念桃
這麼專業的問題在這裡問,你肯定是得不到答案的,查專業書靠得住些。
6樓:曾
多加temed是正確的
加標準值的兩倍
sds-page蛋白電泳膠對身體有害處嗎?
7樓:匿名使用者
有害的,首先制膠中使用丙烯醯胺和甲叉雙丙烯醯胺具有神經毒性作用,人體吸**後可致基因突變。裂解液
答含pmsf劇毒,嚴重損害呼吸道粘膜、眼睛及**。過硫酸銨對**粘膜有刺激性和腐蝕性。甲醇有較強的毒性,對人體的神經系統和血液系統影響大。
dab有較強的致癌性。 這只是我自己的看法,呵呵。
8樓:杜敬霆
沒有,sds是一種類似洗衣粉的物質,只是顆粒要小得多,凝膠一般也無毒
SDS PAGE電泳染色問題,SDS PAGE電泳遇到的問題。
條帶變黃這個現象沒有碰到過,什麼叫底部條帶變成黃色,其它條帶呢?有正常的麼?染色分快染和慢染,快染做法是先用染色液進行染色1h左右,如果嫌麻煩就在微波爐里加熱30s,再染30分鐘左右的樣子就可以了,然後進行脫色,1小時內更換三次脫色液,基本就可以清楚的看到條帶了。慢染是先用脫色液進行15脫色,再在脫...
膠原蛋白與膠原蛋白肽一樣嗎,膠原蛋白肽與膠原蛋白有區別嗎
膠原蛋白 collagen 是人體內含量最多 分佈最廣的蛋白質,是一種與組織和器官功能密切相關的功能性蛋白。膠原蛋白主要分佈在人體的結締組織中,對人體 血管 骨胳 筋腱和軟骨的形成以及維持其韌性和彈性都十分重要。膠原蛋白在高等動物機體中的含量豐富,約佔蛋白質總量的1 3。其中,總重的70 為膠原蛋白...
如何做好血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳實驗
北京索萊寶科技 做好血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳實驗的方法 電泳時,電壓應控制在 110 140v 不能過高,若電壓太高,產熱量大,則蛋白質標本會破壞,並且電壓高則帶電顆粒移動速度快,分離效果不理想。醋酸纖維素薄膜在電泳前,一定要在緩衝液中浸透,否則有礙電泳分離,最好是浸泡過夜,效果最佳。點樣時樣品一定...