1樓:感情五味瓶
1、首先,柱長,內徑,粒徑,孔徑,「碳度」(固定相表面矽醇基氫被碳鏈,如c18所取代的程度)等等是液相色譜柱的規格,與之相聯絡的是分析方法,也即特定的分離柱可以在這個方法中表現出很好的柱效,而對另乙個方法卻完全不適用。所以柱效是對包括特定分離柱的方法而言,不是直接針對上述分離柱規格的。
2、對於選定的分離柱使用特定的方法的適用程度可以用柱效來衡量,例如峰寬,分離度,拖尾因子,容量因子,相對容量因子,理論板塔塊數等都是衡量的物理量。這些物理量是相互關聯。常常是互相影響的。
特定的分離柱的柱效可以通過調節流動相組分及比例,流動相梯度,柱溫,流速,等來優化,使這些用來衡量柱效的物理量之間達到最佳表現組合,這個組合也就是這個分析方法(包括這根分離柱)。
3、特定的分離柱在用特定的方法的一段時間後其柱效可能會降低,例如拖尾因子變大,理論塔板數變小等等,這可以稱為柱效降低。降低到一定程度時,分離柱需要採用適當的溶劑清洗。清洗無效,那就要更換,採用新柱子。
2樓:王者
柱長、直徑、粒徑、
標準分離試劑的分離度,理論塔板數。
色譜峰的形狀等。
高效液相色譜法用於含量測定的原理是什麼?
3樓:天然槑
原理是該物質(的官能團。
在某一特定波長下有吸收,並且,該物質濃度和峰面積成正比。即:a樣品/a對照=c樣品/c對照。
c,為濃度,可以理解成c=質量(mg)*純度(%)/稀釋倍數(ml)
所以在使用標準品進行含量標定的時候,標準品的純度是已知的量,稱取一定量標準品後進行定容稀釋。進樣分析後,峰面積可從圖譜上讀取(a樣品).
樣品也稱取一定的質量,稀釋後進樣分析。然後讀取峰面積(a對照).公式中之後樣品純度是未知數,最後計算結果。
也有情況是在沒有標準品的情況下用面積歸一化法計算的,就是進樣後從圖譜上讀取雜質,按照峰面積的百分比計算。這種方式有很大的侷限性,故不經常使用。
衡量色譜柱柱效能的指標什麼呢
4樓:信必鑫服務平臺
衡量色譜柱效能的指標是有效理論塔板數n或者有效塔板高度h。
柱效能指標包括在一定實驗條件下(樣品、流動相、流速、溫度)下的柱壓、理論塔板高度和塔板數、對稱因子、容量因子和選擇性因子的重複性,或分離度。一般說來容量因子和選擇性因子的重複性在±5%或±10%以內。進行柱效比較時,還要注意柱外效應是否有變化。
柱效受柱內外因素影響,為使色譜柱達到最佳效率,除柱外死體積要小外,還要有合理的柱結構(儘可能減少填充床以外的死體積)及裝填技術。
對於一般的分析只需5000塔板數的柱效;對於同系物分析,只要500即可;對於較難分離物質對則可採用高達螞跡2萬的柱子,因此一般10~30cm左右的柱長就能滿足複雜混合物分析的需要。在一般的液相色譜系統中,柱外效應對柱效的影響遠遠大於管壁效應。
根據速率理論,提高色譜柱效的途徑有哪些
5樓:更加專業
要提高液相色譜的效率可從以下幾方面入手。
1)降低移動相的流速,但會使分析時間延長。
2)減少固定相的量,但色譜柱中樣品的負載量也隨之減小。
3)減小固定相的顆粒度,但不能過分,過分後色譜柱的滲透率也會減小。
4)選用低粘度的移動相,以利於快速傳質,但卻不利於多組份分析。
5)適當提高柱溫,可降低移動相的粘度,但柱效和分離度也隨之降低。
6)儘量減小停滯移動相的體積,但卻加快了移動相的流速。
從以上介紹可看出,在色譜分析過程中,各種因素是互相聯絡和制約的。只有通過對。
柱效值的跟蹤測算,對自己分析方法不斷的研究和實踐,才能找到最佳的工作條件。
衡量色譜柱柱效能的指標什麼呢
6樓:帝都小女子
a、塔板高度。
b、分離度。
c、塔板數。
d、分配係數。
b是色譜柱的選擇性。
d分配係數是指在固液兩相體系達平衡狀態時,溶質在兩相中的濃度的比值。
分配係數反映了溶質在兩相中的遷移能力及分離效能,是描述物質在兩相中行為的重要物理化學特徵引數。
分配係數與組分、流動相和固定相的熱力學性質有關,也與溫度、壓力有關。在不同的色譜分離機制中,k有不同的概念:吸附色譜法為吸附係數,離子交換色譜法為選擇性係數 (或稱交換系數),凝膠色譜法為滲透引數。
但一般情況可用分配係數來表示。
在條件(流動相、固定相、溫度和壓力等)一定,樣品濃度很低時(cs、cm很小)時,k只取決於組分的性質,而與濃度無關。這只是理想狀態下的色譜條件,在這種條件下,得到的色譜峰為正常峰;在許多情況下,隨著濃度的增大,k減小,這時色譜峰為拖尾峰;而有時隨著溶質濃度增大,k也增大,這時色譜峰為前延峰。因此,只有儘可能減少進樣量,使組分在柱內濃度降低,k恆定時,才能獲得正常峰。
在同一色譜條件下,樣品中k值大的組分在固定相中滯留時間長,後流出色譜柱;k值小的組分則滯留時間短,先流出色譜柱。混合物中各組分的分配係數相差越大,越容易分離,因此混合物中各組分的分配係數不同是色譜分離的前提。
在hplc中,固定相確定後,k主要受流動相的性質影響。實踐中主要靠調整流動相的組成配比及ph值,以獲得組分間的分配係數差異及適宜的保留時間,達到分離的目的。
7樓:網友
用分離度r衡量整個分離的效果;主要與柱效n 容量因子k 分離因子a
如果是柱效率就是塔板數n或踏板高度,其實衡量的是色譜峰的展寬,即峰的寬度,如果同樣條件下,峰越窄,就是柱效率越高,分離度也越高。
8樓:網友
塔板數、對稱因子、柱壓等等。
影響色譜柱效能因素有哪些
9樓:沛沛豬的母嬰小智慧
一、物理因素:
1) 矽膠純度:矽膠純度和殘留金屬離子濃度,矽膠的雜質會影響化合物的峰形,矽膠表面的金屬含量高會影響鹼性化合物的峰形,易發生拖尾。
2) 色譜柱尺寸填料床的長度和內徑,增加色譜柱長度,可以在一定程度上提高柱效,但也會公升高壓力和導致峰展寬;寬柱徑,提高載樣量,但也會增加橫向擴散,同樣會導致峰展寬。窄柱徑可以節約溶劑,可減少橫向擴散,但壓力較大,對系統要求較高。
3) 顆粒形狀及粒徑球形顆粒柱效高、重現性好、柱床結構均勻,不規則形柱床結構不均勻、流動相線速度不均勻,容易譜帶展寬;平均顆粒直徑,粒徑越小,柱效越高,柱壓也越高。粒徑分佈越廣則柱效越低,壓力越大。
4) 顆粒表面積:顆粒外表面和內部孔表面的總和,以m2/g表示,相對而言高表面積對樣品具有較強的保留能力,更大的柱容量和分離度。而低表面積能更快達到平衡狀態,更適合梯度洗脫程式。
5) 孔徑:顆粒的孔或腔的平均尺寸,範圍是80~300?,大孔徑的填料顆粒可以延長大分子溶質在填料表面的滯留時間,改善分離,所以大孔徑填料適合分離大分子化合物或者水動力體積較大的分子。
二、化學因素:
1) 鍵合型別及鍵合相:鍵合相分子與基體單點相連為單體鍵合,這種鍵合方式可以提高傳質速率,縮短柱平衡時間,;聚合體鍵合為鍵合相分子與基體多點相連,這種鍵合方式可以增加色譜柱穩定性,增載入樣量。而鍵合相不同會直接影響化合物的保留行為。
2) 碳覆蓋率:高碳覆蓋率可以提高解像度和重現性,但分析時間長。
3) 封端:矽膠鍵合相填料中有部分未封端的殘留矽羥基,如圖封端可以減輕待測組分與矽膠表面殘留的酸性矽羥基反應,改善保留和峰行,這對於鹼性化合物尤其重要。而不同的封端技術也會直接影響色譜柱的效能。
氣相色譜柱分為哪幾種
10樓:網友
1. 按柱粗細可分為一般填充柱和毛細管柱兩類。
填充色譜柱:多用內徑4~6mm的不鏽鋼管制成螺旋形柱管,常用柱長2~4m。填充液體固定相(氣-液色譜)或固體固定相(氣-固色譜)。
毛細管色譜柱:柱管為毛細管,常用內徑的玻璃或彈性石英毛細管,柱長几十公尺至百公尺。
毛細管色譜柱按填充方式可分為開管毛細柱及填充毛細柱。
2. 按分離機制可分為分配柱和吸附柱等,它們的區別主要在於固定相。
分配柱:一般是將固定液(高沸點液體)塗漬在載體上,構成液體固定相,利用組分的分配係數差別而實現分離。將固定液的官能團通過化學鍵結合在載體表面,稱為化學鍵合相(chemically bonded phase),不流失是其優點。
吸附柱:將吸附劑裝入色譜柱而構成,利用組分的吸附係數的差別而實現分離。除吸附劑外,固體固定相還包括分子篩與高分子多孔小球等。
色譜柱為什麼要老化 老化時的柱溫和載氣流速應如何控制 老化好的標誌是什麼
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