1樓:
因為eb染色的原理是eb插入到dna的鹼基對之間,然後在紫外光照射下激發發光。所以dna含量越高,而且dna鏈越長的條帶就會越亮。
2樓:匿名使用者
溴化乙錠是一種高度靈敏的熒光染色劑,用於觀察瓊脂糖(agarose)和聚丙烯醯胺凝膠中的dna。溴化乙錠用標準302nm 紫外光透射儀激發並放射出橙紅色訊號。
觀察瓊脂糖凝膠中dna最常用的方法是利用熒光染料溴化乙錠進行染色,溴化乙錠含有一個可以嵌入dna堆積鹼基之間的一個三環平面基團。它與dna的結合幾乎沒有鹼基序列特異性。在高離子強度的飽和溶液中,大約每2.
5個鹼基插入一個溴化乙錠分子。當染料分子插入後,其平面基團與螺旋的軸線垂直並通過範德華力與上下鹼基相互作用。這個基團的固定位置及其與鹼基的密切接近,導致與dna結合的染料呈現熒光,其熒光產率比遊離溶液中染料有所增加。
溴化乙錠可以用來檢測單鏈或雙鏈核酸(dna或rna)。但是染料對單鏈核酸的親和力相對較小,所以其熒光產率也相對較低。
dna量越多,條帶就會越亮。
dna電泳後點樣孔處很亮是為什麼啊?
3樓:湯萌
是不是eb染色??
如果是eb染的,如果如浙大阿米巴所說,在膠上挖個洞,沒有dna與eb的複合物在裡面,在紫外燈下看是不可能很亮的。普通的折光,在紫外下面根本沒什麼區別。
如果你在紫外下看的點樣孔真的是很亮,跟你跑出來的dna條帶亮度一致,甚至更亮,那麼肯定是有dna滯留在點樣孔。
那麼我個人覺得,你要考慮以下幾個方面:
1,你的dna樣品不純,含蛋白質等雜質(如果你是自己提出來的dna就更有可能是這個原因)。但是你的marker居然也這樣。那麼可能是第二個原因。
2,你的dna膠的濃度配錯了??膠的孔隙過小,不在分辨你的dna樣品的範圍內?這樣,理論上,樣品確實可能滯留於點樣孔。
3,你的點樣孔有雜質,阻礙了dna的泳動。 可能是你的梳子沒洗乾淨。這個錯誤是我犯過的。
個人意見,你參考參考。
4樓:浙大阿米巴
這是折光的關係。你在膠上挖個洞都會這樣。
dna的電泳實驗為什麼跑出來是一條亮白色的條帶
5樓:匿名使用者
這種問題真的不好直接用文字回答你。首先你要搞明白為什麼要電泳,電泳的目的是什麼。我不知道你有沒有親自做過電泳,首先希望你先查詢下如何dna電泳。在dna電泳前,
在需要電泳的dna溶液里加上loading buffer,目的是在電泳時可以看到指示帶,有兩條:跑在前面的藍色條帶是溴酚藍,位置大約相當於300bp的dna,後面的綠色條帶是二甲苯青ff,相當於4000bp左右大小dna的位置。
2. 在製備瓊脂糖膠時,需要加入eb,eb可以與dna結合,在紫外燈下顯示dna位置,也就是你說的白色條帶。
3. 現在有些實驗室用一些新型染料(eb有毒),可以用藍光而不是紫外觀察條帶,這個時候看到的dna條帶其實是淡藍色的,不是白色的。
不知道你明白沒有? 我要看文獻了,下午老闆要找我談話。。。。。
凝膠成像系統壞了,dna瓊脂糖電泳後eb染色還有其他的拍照方法不?可不可以放在紫外光下,用數碼相機拍照?
6樓:匿名使用者
情況緊急的話,試一下將膠放在有紫外燈的屋子裡靠玻璃門邊,開啟紫外燈後隔著玻璃試一下?
dna電泳條帶都代表什麼啊?
7樓:123來不及
電泳帶表示不同大小的dna分子片段,同一分子如果用相同方法處理,電泳帶大小應該是不變的,與marker同時跑電泳的話,可以根據不同片段與marker帶的對比,推測出片段大小.帶的粗細表現該片段的含量的多少.
8樓:泡泡q愛
根據色帶的深淺可以大概估計含量吧
根據雜帶的多少可以判斷純度
根據和對比帶(marker)比較,可以大概知道片段的大小
9樓:匿名使用者
由於各種dna分子的帶電量和質量的不同,電泳時會被分離。同一條帶的dna分子所帶的電荷和質量是相等的
10樓:匿名使用者
一條一條的就是不同長度的dna,也有可能有rna
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