1樓:瀟逍霄
此次試驗一般會有兩個疑問:
1.為什麼用無水乙醇沉澱dna?
用無水乙醇沉澱dna,這是實驗中最常用的沉澱dna的方法。乙醇的優點是可以任意比和水相混溶,乙醇與核酸不會起任何化學反應,對dna很安全,因此是理想的沉澱劑。
dna溶液是dna以水合狀態穩定存在,當加入乙醇時,乙醇會奪去dna周圍的水分子,使dna失水而易於聚合。一般實驗中,是加2倍體積的無水乙醇與dna相混合,其乙醇的最終含量佔67%左右。因而也可改用95%乙醇來替代無水乙醇(因為無水乙醇的**遠遠比95%乙醇昂貴)。
但是加95%的乙醇使總體積增大,而dna在溶液中有一定程度的溶解,因而dna損失也增大,尤其用多次乙醇沉澱時,就會影響收得率。折中的做法是初次沉澱dna時可用95%乙醇代替無水乙酵,最後的沉澱步驟要使用無水乙醇。也可以用0.
6倍體積的異丙醇選擇性沉澱dna。一般在室溫下放置15-30分鐘即可。
2.在用乙醇沉澱dna時,為什麼一定要加naac或nacl至最終濃度達0.1~0.25mol/l?
在ph為8左右的溶液中,dna分子是帶負電荷的,加一定濃度的naac或nacl,使na+中和dna分子上的負電荷,減少dna分子之間的同性電荷相斥力,易於互相聚合而形成dna鈉鹽沉澱,當加入的鹽溶液濃度太低時,只有部分dna形成dna鈉鹽而聚合,這樣就造成dna沉澱不完全,當加入的鹽溶液濃度太高時,其效果也不好。在沉澱的dna中,由於過多的鹽雜質存在,影響dna的酶切等反應,必須要進行洗滌或重沉澱。
2樓:瀟vs逍
用無水乙醇沉澱dna,這是實驗中最常用的沉澱dna的方法。乙醇的優點是可以任意比和水相混溶,乙醇與核酸不會起任何化學反應,對dna很安全,因此是理想的沉澱劑。
dna溶液是dna以水合狀態穩定存在,當加入乙醇時,乙醇會奪去dna周圍的水分子,使dna失水而易於聚合。一般實驗中,是加2倍體積的無水乙醇與dna相混合,其乙醇的最終含量佔67%左右。因而也可改用95%乙醇來替代無水乙醇(因為無水乙醇的**遠遠比95%乙醇昂貴)。
但是加95%的乙醇使總體積增大,而dna在溶液中有一定程度的溶解,因而dna損失也增大,尤其用多次乙醇沉澱時,就會影響收得率。折中的做法是初次沉澱dna時可用95%乙醇代替無水乙酵,最後的沉澱步驟要使用無水乙醇。也可以用0.
6倍體積的異丙醇選擇性沉澱dna。一般在室溫下放置15-30分鐘即可。
3樓:道峰山營
因為dna溶液是dna以水合狀態穩定存在,當加入乙醇時,乙醇會奪去dna周圍的水分子,使dna失水而易於聚合。
脫氧核糖核酸(英語:deoxyribonucleic acid,縮寫為dna)又稱去氧核糖核酸,是一種分子,雙鏈結構,由脫氧核糖核苷酸(成分為:脫氧核糖及四種含氮鹼基)組成。
可組成遺傳指令,引導生物發育與生命機能運作。
主要功能是長期性的資訊儲存,可比喻為「藍圖」或「食譜」。其中包含的指令,是建構細胞內其他的化合物,如蛋白質與rna所需。
DNA能通過核孔嗎 為什麼,DNA能通過核孔嗎 為什麼
我們都知道核內dna是與蛋白質等結合在一起成為染色質的,染色質加上dna對於核孔來說實在是太大了!不可能出去。再說,dna是遺傳物質,怎麼能跑到細胞質中去呢,要是能跑出去還要rna幹什麼呢。 基因組dna太大不可能通過,但是如果外源轉入小的dna單鏈或雙鏈片段,因為非常小所以可以通過核孔。 不能 通...
為什麼酒精可以燃燒,為什麼酒精能燃燒是物理變化,可卻是化學性質
假面 原因是酒精屬於有機物,而有機物一般都能燃燒。所以酒精可以燃燒。38 以上的都能燃燒,高於40度易燃狀態。用蒸餾法提高酒精濃度最多能到73 左右,因為乙醇和水會形成共沸混合物。藥用酒精只是濃度為70 體積比 的酒精,可以用化學合成酒精。實際上,在化學中,乙醇俗稱酒精。哪怕1 的乙醇,也可以成為酒...
DNA為什麼是雙螺旋結構,DNA為什麼是雙螺旋結構?有什麼意義?
知否 dna是高分子聚合物,dna溶液為高分子溶液,具有很高的粘度,可被甲基綠染成綠色。dna對紫外線 260nm 有吸收作用,利用這一特性,可以對dna進行含量測定。當核酸變性時,吸光度升高,稱為增色效應 當變性核酸重新復性時,吸光度又會恢復到原來的水平。較高溫度 有機溶劑 酸鹼試劑 尿素 醯胺等...