用高效液相色譜法怎麼算的樣品濃度

1樓：匿名使用者

含量=[（濃度x稀釋倍數）/供試品稱樣量]x100%首先確定樣品成分，獲取該成分的純品（對照品），將對照品溶液配製成與樣品成分濃度相當的濃度（比如樣品濃度是10mg/ml左右，對照品溶液就配製成10mg/ml）。

對照品溶液和供試品溶液分別進樣，進行色譜分析，獲得對照品成分峰面積與供試品溶液峰面積

此時已知對照溶液峰面積，對照溶液濃度，求供試品溶液濃度，因為成分在液相中響應值不變，故對照品溶液濃度/對照品溶液峰面積=f（即響應因子）=供試品溶液濃度/供試品溶液峰面積，求得供試品溶液濃度。

2樓：匿名使用者

首先確定樣品成分，獲取該成分的純品（對照品），將對照品溶液配製成與樣品成分濃度相當的濃度（比如樣品濃度是10mg/ml左右，對照品溶液就配製成10mg/ml）。對照品溶液和供試品溶液分別進樣，進行色譜分析，獲得對照品成分峰面積與供試品溶液峰面積。此時已知對照溶液峰面積，對照溶液濃度，供試品溶液峰面積，求供試品溶液濃度，因為成分在液相中響應值不變，故對照品溶液濃度/對照品溶液峰面積=f（即響應因子）=供試品溶液濃度/供試品溶液峰面積，求得供試品溶液濃度。

如果想算含量，含量=[（濃度x稀釋倍數）/供試品稱樣量]x100%

高效液相色譜法怎樣計算檢出限和定量限

3樓：sky不用太多

首先要採集一段基線，看一看波動情況，需要一段穩定的波動，看看最高點和最低點之間的高度。這個就是你的儀器噪音。

然後是將你需要測定的樣品進樣分析，當訊雜比為10的時候，這個濃度就是定量限；當訊雜比為3的時候，這個濃度就是檢測限。訊雜比的意思就是訊號/噪音。

比如說，你的噪音高度大約是0.1mv，那麼檢測限就是你的待測樣品逐級稀釋至樣品峰高為0.3mv時樣品的濃度，定量限則是峰高為1.0mv時的樣品濃度。

你可以選擇線性最小濃度的樣品進樣，假設它的濃度是10ug/ml，進樣後主峰峰高是10mv，那麼你的定量限濃度大約是這個濃度稀釋10倍，也就是1ug/ml。而檢測限濃度則需要這個濃度再稀釋3倍，大約是0.3ug/ml

高效液相色譜法（high performance liquid chromatography \ hplc）又稱「高壓液相色譜」、「高速液相色譜」、「高分離度液相色譜」、「近代柱色譜」等。高效液相色譜是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，採用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩衝液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離後，進入檢測器進行檢測，從而實現對試樣的分析。該方法已成為化學、醫學、工業、農學、商檢和法檢等學科領域中重要的分離分析技術應用[1] 。

高效液相色譜法有「四高一廣」的特點：

①高壓：流動相為液體，流經色譜柱時，受到的阻力較大，為了能迅速通過色譜柱，必須對載液加高壓。

②高速：分析速度快、載液流速快，較經典液體色譜法速度快得多，通常分析一個樣品在15～30分鐘，有些樣品甚至在5分鐘內即可完成，一般小於1小時。

③高效：分離效能高。可選擇固定相和流動相以達到最佳分離效果，比工業精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。

④高靈敏度：紫外檢測器可達0.01ng，進樣量在μl數量級。

⑤應用範圍廣：百分之七十以上的有機化合物可用高效液相色譜分析，特別是高沸點、大分子、強極性、熱穩定性差化合物的分離分析，顯示出優勢。

⑥柱子可反覆使用：用一根柱子可分離不同化合物

⑦樣品量少、容易**：樣品經過色譜柱後不被破壞，可以收集單一組分或做製備。

此外高效液相色譜還有色譜柱可反覆使用、樣品不被破壞、易**等優點，但也有缺點，與氣相色譜相比各有所長，相互補充。高效液相色譜的缺點是有「柱外效應」。在從進樣到檢測器之間，除了柱子以外的任何死空間（進樣器、柱接頭、連線管和檢測池等）中，如果流動相的流型有變化，被分離物質的任何擴散和滯留都會顯著地導致色譜峰的加寬，柱效率降低。

高效液相色譜檢測器的靈敏度不及氣相色譜。

高效液相色譜儀標準曲線怎麼做

4樓：zzx梓

做標準曲線首先有標準物質，然後有一個曲線的濃度範圍。比如說，標準物質x，濃度是0.1mg/ml-2mg/ml。

配製樣品的時候，取x適量，配製成濃度為10mg/ml的母液，然後逐級稀釋，配製成濃度為0.1mg/ml，0.2mg/m，0.

5mg/ml，1.0mg/ml，2.0mg/ml的樣品，然後按照濃度由低到高的順序進樣分析。

（由低到高是避免系統誤差）

注意：這裡是配製一份樣品，稀釋成若干線性用的樣品。一般至少5個濃度。

5樓：千葉雅之

在色譜中，峰面積和濃度是成正比的。標準曲線就是一條橫軸是濃度，縱軸是峰面積的曲線。

做標準曲線首先你的有標準物質，然後有一個曲線的濃度範圍。

比如說，標準物質x，濃度是0.1mg/ml-2mg/ml。

配製樣品的時候，取x適量，配製成濃度為10mg/ml的母液，然後逐級稀釋，配製成濃度為0.1mg/ml,0.2mg/ml,0.

5mg/ml,1.0mg/ml,2.0mg/ml的樣品，然後按照濃度由低到高的順序進樣分析。

（由低到高是避免系統誤差）

注意：這裡是配製一份樣品，稀釋成若干線性用的樣品。一般至少5個濃度。

比如結果是：

濃度峰面積

0.1 10

0.2 20

0.5 49

1.0 95

2.0 195

然後可以再excel上形成散點圖。然後新增趨勢線，並且顯示r2和公式。這個y=97.

04x+0.0498就是這個線性公式，r2是相關係數。我故意做的偏了一點。

這個係數越接近1，你的線性做得就越準。

6樓：千葉雅之

具體專案得具體分析。

大概就是說：物質x，配製一瓶母液，然後逐級稀釋，配製出至少五個不同的濃度，然後分別進樣分析。

我們都知道，液相的峰面積和濃度呈正比關係，進樣之後，可以讀出峰面積。把這些資料輸入excel，形成一個散點圖，橫軸是你的樣品濃度，縱軸是峰面積，就會形成一條直線。然後你要在圖譜上顯示趨勢線、顯示公式、尤其是要顯示r2，一般相關係數r2越接近1，就說明你的線性做得越好。

怎樣用高效液相色譜法計算檢出限和定量限？

7樓：sky不用太多