1樓：
流式細胞術檢測小鼠腹腔巨噬細胞吞噬能力
巨噬細胞是固有免疫系統的重要成員， 具有吞噬、 清除及呈遞抗原異物的生物學功能， 是維持機體的正常生理狀態所必需的 。
傳統的顯微鏡鏡檢記數法檢測巨噬細胞吞噬能力存在主觀性強、 重複性差及耗時長等缺點， 影響實驗結果的客觀性與準確性。流式細胞儀技術用於巨噬細胞的吞噬率檢測可以輕易地將觀察細胞數從幾百上升至幾千， 而且具有分析速度快、 重複性好和特異性強等優點。熒光微球被細胞吞噬後， 其熒光訊號可迅速被流式細胞儀檢測， 具有熒光訊號的巨噬細胞即視為出現吞噬現象， 可 快速、 準 確地測 定 巨噬細胞 的吞 噬率 。
《 保健食品檢驗與評價技術規範增強免疫力功能評價方法( 徵求意見稿) 》 中要求用小鼠腹腔巨噬細胞吞噬熒光微球試驗替代巨噬細胞吞噬雞紅細胞實驗》， 本研究的主要 目的是在徵求意見稿的基礎上， 摸索最佳實驗條件， 從而使該方法能靈敏穩定的反映小鼠腹腔單核一 巨噬細胞吞噬能力。
本文利用流式細胞術檢測小鼠腹腔巨噬細胞吞噬熒光微球能力試驗方法的靈敏性、 穩定性以及易操作性，結果發現：小鼠腹腔巨噬細胞濃度調整為1*10e5~2*10e5/ml，孵育1h，1 × 10e7／孔微球濃度可使實驗快速而又精確地反映巨噬細胞的吞噬率和吞噬指數。
檢測巨噬細胞的功能還有什麼方法?
2樓：百暮來風
巨噬細胞功能檢測方法：
人巨噬細胞可從外周血或經斑蝥激發的皮皰液中獲取，也可從肺灌洗液或患者腹膜透析液中分離，但操作繁鎖，得量不多。許多實驗室在進行基礎或配合臨床研究巨噬細胞功能及其與疾病的關係、或篩檢免疫增強藥物和**其作用機制時，常選用小鼠腹腔巨噬細胞為研究物件，常用的檢測方法如下。
（一）炭粒廓清試驗
正常小鼠肝中枯否細胞可吞噬清除90%炭粒醫學教|育網蒐集整理，脾巨噬細胞約吞噬清除10%炭粒，據此給小鼠定量靜脈注射印度墨汁（炭粒懸液），間隔一定時間反覆取靜脈血，測定血中炭粒的濃度，根據血流中炭粒被廓清的速度，判斷巨噬細胞的功能。
（二）吞噬功能的檢測
巨噬細胞具有較強的吞噬功能，實驗室常用比細菌大的細胞性抗原作為被吞噬顆粒，如雞紅細胞。其檢測原理是將受檢細胞與適量的顆粒抗原混合後，置
37℃保溫0.5～1h，其間時加振搖，最後離心取測定細胞製成塗片，染色鏡檢，分別計數出吞噬百分比和吞噬指數。各實驗室應根據自己的條件建立正常參考值。
（三）巨噬細胞溶酶體酶的測定
巨噬細胞富含溶酶體酶，如酸性磷酸酶、非特異性酯酶、溶菌酶等，測定這些酶的活性也是衡量巨噬細胞功能的實用指標之一。
1.酸磷酸酶的測定
（1）硝酸鉛法：本法優點是用普通試劑，**便宜，一般實驗室均有條件做，封片後可較長時間儲存，並可用電子顯微鏡研究觀察細胞的超微結構。缺點是細胞必需固定，而且固定條件要求嚴格，如處理不當酶活性易消失，反應步驟也較多。
該法基本原理是在適當的酶性條件下，巨噬細胞內的酸性磷酸酶能使β甘油磷酸鈉水解成磷酸鹽後，後者與硝酸鉛反應產生磷酸鉛，而磷酸鉛再與硫酸銨反應則形成黑色硫化鉛，沉積在胞漿內酸所在處，顯示棕黑色顆粒。酶活性強弱可根據顆粒的數量和粗細不同而分級判斷，顆粒數量少則細的為+，顆粒多而粗的為++，顆粒很多且很粗的為+++.
（2）偶氮法：本法操作簡便，反應液中的底物α-萘磷酸鈉被酸性磷酸酶分解後，形成萘酚和磷酸鹽，而萘酚結構中的羥基（-oh）鄰近的活潑碳原子，立即與偶氮染料起反應，而產生鮮豔的棕色沉積在酶所在處，缺點是封片後儲存時間短。
2.非特異性酶的測定該酶比較穩定，酶活性喪失較慢，細胞經塗片乾燥，置室溫至少可儲存半天至一天，因此特別有利於臨床檢驗室採用。
常用α-萘醋酸法，該酶可將-萘醋酸分解成萘酚和醋酸，萘酚迅速與偶染料結合，形成有色反應物而沉積。
（四）巨噬細胞促凝血活性測定
啟用巨噬細胞可產生一種與膜結合的凝血活性因子，加速正常血漿的凝固，為此取已經37℃預溫的正常兔血漿和cac12混合液，加入經粘附單層巨噬細胞的試管中，移置37℃，即時記錄血漿凝固時間。實驗證明當巨噬細胞與lps、腫瘤相關抗原或hbsag等溫育後，可見血漿凝固時間明顯縮短。本法穩定方便，也是檢測不同疾病患者巨噬細胞功能的指標之一。
3樓：匿名使用者
巨噬細胞吞噬物在形態上易於觀察和檢測,這些特徵...2011-11-23 巨噬細胞的功能有哪些 22 2011-...培養液中細胞濃度的測定方法(應選用什麼染色方法)...
4樓：回來了拘
免疫學 實驗的思考題
什麼是細胞學檢查？有什麼優缺點
5樓：
由於惡性腫瘤細胞比正常細胞容易從原位脫落，故可用各種方法取得瘤細胞或組織顆粒，鑑定其性質。例如：用濃集法收集痰、腹水、腦水或沖洗液等的細胞；用拉網法收集食管和胃的脫落細胞；用印片法取得表淺的瘤體表面細胞，還可用穿刺法取得比較深在的瘤細胞
(一)優點 1．方法簡便易行，容易掌握。2．對裝置要求不高，費用低，易推廣。3．患者痛苦少或**苦，樂於接受。
4．取材方便，可反覆取材，不影響**。5．診斷迅速，檢出率高，深受臨床醫生歡迎。 (二)缺點 由於診斷細胞學主要是觀察細胞形態變化而看不到組織結構的改變，因此存在一定的侷限性。
主要表現有以下幾個方面：1．檢查屬抽樣性取材，因此取材不準或製片過厚、過薄均可影響診斷。 2．脫落細胞常有退變、易受人為因素的影響。
3．塗片中看不到組織結構的改變，故診斷準確性受一定影響，病變分型較困難。 4．易出現假陰性或假陽性。
要給我加分哦~~
求醫學檢驗常用的檢測方法，要具體詳細說說每種方法的優缺點
6樓：匿名使用者
你能具體說下什麼東西的檢測方法嗎？
生化常用：比色法，紫外吸收法，分光光度法，測物質含量。........
免疫常用：elisa法檢測各種抗原或者抗體。還有免疫金法檢測結核抗體。.......
微生物培養法，藥敏試驗......
放射免疫檢測腫瘤的一些標誌物。
血常規用的是三分群或者五分群的血液分析儀，原理同流式細胞術。
尿液的乾溼化學分析，用的是儀器，但檢測不同專案用的具體方法不一樣。
流式細胞術的作用原理
7樓：是張曉易啊
利用流式細胞術快速精確的對單個細胞的理化性質進行定量分析和分選，主要通過幾個步驟：製備單細胞懸液，用特異性熒光染料標記的抗體進行染色，經染色後的待測細胞在一定氣體壓力下被壓入流動室，在鞘液的包裹下細胞呈單行排列，依次通過檢測區域，在鐳射束的照射下細胞會產生散射光和激發熒光。這兩種訊號會同時被光電倍增管( pmt) 接收。
接收後可轉換為電訊號，通過模/數轉換器，將連續的電訊號轉換為可被計算機識別的數字訊號，進行分析。
流式細胞術實驗流程
單細胞懸液的製備：流式細胞術檢測的物件一般是細胞，並且是呈獨立狀態的懸浮於液體中的細胞。如果要檢測組織中的細胞，須先將組織製備成單細胞懸液。
如果該培養細胞是貼壁細胞，需用胰酶消化處理；如果是胸腺、脾臟和淋巴結等外周免疫器官，直接將臟器用研磨製成單細胞懸液；如果是實體臟器（如肺臟、肝臟和腫瘤組），細胞之間結合較緊密，將臟器剪碎後加入iv型膠原酶和dna核酸內切酶進行細胞消化後再進行研磨。
熒游標記與上樣：細胞懸液製成後，用特異性熒游標記的抗體與細胞上的抗原結合以達到對細胞熒游標記（染色）。在恆定氣體的壓力下進入流動室，不含細胞或微粒的緩衝液在高壓下從鞘液管噴出，鞘液管入口方向與待測樣品流形成一定角度，鞘液包繞著樣品高速流動，組成一個圓柱形的液流束，待測細胞或微粒在鞘液的包被下單行排列，依次通過檢測區域。
鐳射照射及熒光訊號收集：流式細胞儀通常以鐳射作為發光源，經過聚焦的光束垂直照射在樣品流上，細胞上的熒光染料被激發，產生散射光和激發熒光。光散射訊號在前向小角度進行檢測，這種訊號基本上反映了細胞體積的大小；熒光訊號的接受方向與鐳射束垂直，經過一系列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離，形成多個不同波長的熒光訊號。
資料處理分析：熒光訊號的強度代表了所測細胞膜表面抗原強度或細胞內物質的濃度，光訊號轉換為可被計算機識別的電訊號。計算機把所測量的各種訊號進行處理分析。內容引自流式細胞術
8樓：匿名使用者
流式細胞術（flow cytometry, fcm）是一種在功能水平上對單細胞或其他生物粒子進行定量分析和分選的檢測手段，它可以高速分析上萬個細胞，並能同時從一個細胞中測得多個引數，與傳統的熒光鏡檢查相比，具有速度快、精度高、準確性好等優點。
將待測細胞染色後製成單細胞懸液。用一定壓力將待測樣品壓入流動室，不含細胞的磷流式細胞術酸緩衝液在高壓下從鞘液管噴出，鞘液管入口方向與待測樣品流成一定角度，這樣，鞘液就能夠包繞著樣品高速流動，組成一個圓形的流束，待測細胞在鞘液的包被下單行排列，依次通過檢測區域。
流式細胞儀通常以鐳射作為發光源。經過聚焦整形後的光束，垂直照射在樣品流上，被熒光染色的細胞在鐳射束的照射下，產生散射光和激發熒光。這兩種訊號同時被前向光電二極體和90°方向的光電倍增管接收。
光散射訊號在前向小角度進行檢測，這種訊號基本上反映了細胞體積的大小；熒光訊號的接受方向與鐳射束垂直，經過一系列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離，形成多個不同波長的熒光訊號。
這些熒光訊號的強度代表了所測細胞膜表面抗原的強度或其核內物質的濃度，經光電倍增管接收後可轉換為電訊號，再通過模/數轉換器，將連續的電訊號轉換為可被計算機識別的數字訊號。計算機把所測量到的各種訊號進行計算機處理，將分析結果顯示在計算機螢幕上，也可以列印出來，還可以資料檔案的形式儲存在硬碟上以備日後的查詢或進一步分析。
檢測資料的顯示視測量引數的不同由多種形式可供選擇。單引數資料以直方圖的形式表達，其x軸為測量強度，y軸為細胞數目。一般來說，流式細胞儀座標軸的解析度有512或1024通道數，這視其模數轉換器的解析度而定。
對於雙引數或多引數資料，既可以單獨顯示每個引數的直方圖，也可以選擇二維的三點圖、等高線圖、灰度圖或三維立體檢視。
細胞的分選是通過分離含有單細胞的液滴而實現的。在流動室的噴口上配有一個超高頻電晶體，充電後振動，使噴出的液流斷裂為均勻的液滴，待測定細胞就分散在這些液滴之中。將這些液滴充以正負不同的電荷，當液滴流經帶有幾千伏特的偏轉板時，在高壓電場的作用下偏轉，落入各自的收集容器中，不予充電的液滴落入中間的廢液容器，從而實現細胞的分離。
流式細胞分析術的工作原理，流式細胞術的用途是什麼
流式細胞術的用途是什麼 細胞或者其他顆粒狀的物體可以被熒游標記的抗體或者替他熒光染料染色。當這些被標記的物體通過流式細胞儀的時候，鐳射照射，得到不同的激發光。用途 1.臨床診斷 比如白血病，淋巴瘤的分型，可以指導 檢測幹細胞的百分率，可以判斷幹細胞 的效果等等。2.實驗研究。根據前面所說的原理。只要...
流式細胞術散點圖引數中“FSC A”與“FSC H”是什麼意
fsc代表的是forward scatter，這個引數和細胞的大小成正比。a 是area的縮寫，h是height的縮寫。這是機器在記錄訊號時所採用的引數 不顯示在使用者介面，一般在除錯機器的時候可以顯示 每個細胞通過鐳射的時候，機器都會記錄一個波狀訊號 一個拱形的訊號 h就是這個拱的高度 代表的是訊...
流式細胞儀的價格
卩s虍衤肀灬 產品名稱 流式細胞儀 英文名稱 flow cytometer 國產 進口 進口 產地 品牌 美國貝克曼庫爾特 型號 epics altra 參考 銷售商 貝克曼庫爾特香港 流式細胞儀 效能引數 epics altra flow cytometer with hypersort cell...