1樓：匿名使用者
【gapdh的作用】廣泛用作western blot蛋白質標準化的內參，即將每個樣品測得的目的蛋白含量與本樣品的gapdh含量相除，得到每個樣品目的蛋白的相對含量，然後才進行樣品與樣品之間的比較。
【gapdh】或g3pdh是甘油醛-3-磷酸脫氫酶（ glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase ）的英文縮寫。gapdh是參與糖酵解的一種關鍵酶，由4個30-40kda的亞基組成，分子量146kda，檢測條帶大約在36kda。gapdh基因幾乎在所有組織中都高水平表達，且gapdh 作為管家基因在同種細胞或者組織中的蛋白質表達量一般是恆定的。
【western blot】蛋白質印跡法（免疫印跡試驗）。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。
通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中表達情況的資訊。
2樓：匿名使用者
3-磷酸甘油醛脫氫酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,gapdh)一直以來被認為是一種只分布在細胞質中、僅在糖酵解過程中起關鍵作用的酶。但是近年來,越來越多的研究表明gapdh是一種多功能蛋白,且在細胞核、細胞質、生物膜上均有定位。如在細胞核內,gapdh參與trna出核、mrna穩定性調節、dna損傷修復、組蛋白轉錄調控、凋亡及神經退行性疾病發生等。
在細胞質中,gapdh有磷酸激酶活性、催化微管聚合的功能及參與細胞保護。在生物膜上,gap-dh可促進膜融合、參與膜轉運等
請問，gapdh作為rt-pcr內參的原理是什麼呀？我知道為什用它做內參了，就是不清楚怎麼用它，謝謝啦！
3樓：士誠小人也
一般認為一些來持家基因的表達
源量在不同狀態下變化不大，所以可以認為它們表達是恆定的，故而用來做內參
簡而言之，就是你有兩個樣品（譬如不同生長條件或者不同組織的），要比較其中某基因a表達轉錄變化，就分別比較兩個樣品中a相對於gapdh的表達即可。譬如，如果第一個條件下a：gapdh=2，在第二個條件下為4，那麼在第二個條件下a基因的轉錄提高了一倍
內參gapdh，b-actin有什麼區別嗎
4樓：皮蛋憨子粥
gapdh和b-actin的區別：
1、定義不同：
gapdh：gapdh或g3pdh是甘油醛-3-磷酸脫氫酶。
b-actin：即「肌動蛋白」，是細專胞的一種重要骨架蛋白。
2、分佈屬方式不同：
gapdh：廣泛分佈於各種組織中的細胞。
b-actin：分佈在骨架當中。
3、作用不同：
gapdh：被廣泛用作抽提total rna，poly(a)+ rna，western blot等實驗操作的標準化的內參。
b-actin：β-actin是pcr常用的內參，β-actin抗體是western blot很好的內參指數。
4、結構不同：
gapdh結構：
b-actin結構：
5、應用不同：
gapdh：蛋白印跡法和內參。
b-actin：
生物化學與分子生物學；氨基酸、多肽與蛋白質；細胞生物學。
5樓：匿名使用者
常用的蛋白內參有 beta actin 和 gapdh，它們是有區別的
gapdh分子量為146kd，檢測條帶大約在36kd，beta actin分子量為42kd。一般選擇回內參與要檢測的目的蛋白的分答子量最好相差5kd以上
另外，細胞總蛋白的western blot的內參蛋白一般用 beta actin ，膜蛋白的western blot一般用gapdh為內參
western 內參用的gapdh 和b-actin蛋白的分子量是多少
6樓：mxx米小夕
western 內參用的gapdh分子量為146kd，檢測條帶大
約在36kd，b-actin分子量為42kd。
嚴謹的western blot實驗設計中要內求有良好的參容照體系，這對實驗結果分析是非常有用。要用western blot比較不同條件下或者不同組織中，目的蛋白表達量的相對多少，前提條件是等量的細胞上樣，才有比較的基礎。特別表達量不高時，上樣量的差別就很可能影響結果的分析。
因此需要內參很重要。
7樓：匿名使用者
常用的蛋白內參抄有 beta actin 和 gapdh，它們是有區別的
gapdh分子量為146kd，檢測條帶大約在36kd，beta actin分子量為42kd。一般選擇內參與要檢測的目的蛋白的分子量最好相差5kd以上
另外，細胞總蛋白的western blot的內參蛋白一般用 beta actin ，膜蛋白的western blot一般用gapdh為內參
為什麼用gapdh 引物
8樓：糟油酒丸
樓主這個問題非常難以回答，其困難之處就好像要回答「為什麼吃麵條？」一樣
答案到底是因為麵條好吃？
麵條可以吃？
為了填飽肚子？
沒有其它食物了？
某某喜歡吃麵條？
傻傻分不清楚有木有？？
9樓：匿名使用者
樓上的那位真沒有說錯。
樓主根本就沒有給出具體的問題方式，讓人如何回答？
10樓：匿名使用者
因為是看家基因，即認為在同種樣本中，這個基因在一定數量的相同階段細胞中表達量是一致的，可以作為內參，為其他突變導致轉錄水平發生變化的基因進行定量或半定量
看家基因gapdhmrna引物是什麼東西？有什麼用？成分
11樓：昊辰國億其
有，gapdh是三bai
磷酸甘油醛脫du氫酶，是糖酵解
途徑中的zhi關dao鍵酶。糖酵解途版徑就是將葡萄糖轉化為atp的過權程，負責為生物體提供能量，幾乎所有的生物都有該途徑。因此gapdh常常被用來作為內參基因，另外還有β-actin、ubqutin等由於其廣泛存在，也可作為內參基因。
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