1樓:末你要
主要原因就是為了depc能被分解,而不至於殘留到耗材上對下游實驗有影響,或是對人身健康有危害,因此才會過夜處理的。
depc(處理)水是指用depc處理過並經高溫高壓消毒的miliq純水。miliq純水加0.1% depc,混勻過夜,121℃,20min。
而後depc即降解成二氧化碳和酒精,失去毒性。
depc是一種有效的核酸酶抑制劑,它能夠與很多酶的-nh,-sh或-oh等基團發生反應,從而破壞酶的活性中心。depc溶液濃度約為0.1% (v/v)時可使rnase失活,從而防止rna被降解。
在進行rna實驗時,常用depc處理實驗所用的各種試劑。
2樓:問星語
這個問題好久了啊,不過我還是想回答一下。
一般過夜處理是指8小時以上,12-16小時都在允許範圍內。
我覺得這種一般就是針對沒有特殊時限要求的實驗做的寬泛要求。很多說明書裡的過夜,最早應該是美國歐洲那邊實驗室做的,他們晚上很少工作,過夜就是讓人下班前放好,第二天早上來收就行了。
也防止寫8小時,有人不理解,一定要半夜起來,覺得這樣效果好,或者一早來急急忙忙設定,好趕在下班前處理好。
3樓:
用來浸泡實驗器材的四個小時就好,這是讓它充分溶解;去rnase水就要過夜了,為了徹底的鈍化水中的rnase
depc水和depc處理水的區別?如何配製?
4樓:兡懫檕
一)depc水是經depc處理過的滅菌蒸餾水。
depc即二乙基焦碳酸酯(diethylprocarbonate),可滅活各種蛋白質,是rna酶的強抑制劑。原位雜交在雜交及其以前的各步處理中,所有液體試劑都應經depc處理。方法是:
取市售depc 1ml,加入1l待處理水(蒸餾水等)中,經猛烈振搖後,於室溫靜止數小時,然後高壓滅菌,以除去降解depc(depc分解為co2和乙醇)。
注意:①depc是一種潛在的致癌物質,在操作中應儘量在通風的條件下進行,並避免接觸**。②含有tris緩衝液的溶液中,不能加入depc。
rna提取無菌水需要用depc處理麼
5樓:匿名使用者
rna提取
無菌水需要用depc處理
一般rna提取試劑盒裡的rnase-free ddh2o就是已經經過depc處理的水,具體還是要看一下說明書。 一個rna提取樣品(以1ml trizol為例)只需要250+20ul depc水。
rna提取的時候,一定要注意防止rna酶作用.
第一點,樣本處理和存放最好都放負80冰櫃.
第二點,實驗過程中你可以使用depc水泡過的槍頭,離心管,保持手套乾淨,帶好口罩,不要說話.
第三點,假如你用trizol提取rna,75%的乙醇也最好採用來菌的depc水來配製.晾乾酒精這一步時間不要太長.
第四點:瓊脂糖凝膠電泳,專漕專用,使用新的電泳緩衝液tbe.
還有呢,也可以在實驗前,採用rnase zap噴噴桌面,也能有一定程度上去除rna酶的影響.
一般提取的時候多多注意,應該問題不大.
糊弄用可以,但是如果是自己做實驗的話最好還是參考一下比較好的文獻總結會比較好!
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