造成PCR假陰性的原因有哪些

時間 2021-08-30 10:57:59

1樓:英讓始雨

pcr的假陰性在檢驗工作中仍很嚴重,並且用些因素經常

被人忽略,嚴重的影響了pcr的使用。可以想象一種假陽性和假陰性都很高的專案,有什麼樣的診斷價值。造成pcr假陰性的原因是複雜

的,也是多樣的。主要有:1.pcr儀本身的質量問題。pcr儀設計原理上的差異和經常出現的質量問題(如:溫控不準等)給臨床帶來

了諸如非特異性擴增(假陽性)、擴增效率下降(假陰性)等問題.2.離心機問題。離心機的質量或使用不正確,造成離心標本模板沒有分

離出來造成假陰性,竊以為這是最易被忽視的問題。其時離心機使用問題不僅在pcr,在整個檢驗工作中都是最易被忽視的問題,只是因為在其他工作中不象

pcr那樣明顯影響檢測結果罷了。離心機是常用的固液分離裝置,其利用離心過程中的離心力而將密度不同的物質分離出來。因此離心機的

關鍵在於離心加速度而不是轉速,根據牛頓定律可知離心力加速度與轉速和有效半徑的有關的,因此對於不同有效半徑的離心機相同的轉速其離心加速度是不同的,

轉速的調節要因離心機而異,但很遺憾,日常工作中忽視了這個問題。有效半徑短的離心加速度就小,同樣的時間離心效果就差可能造成分離不出導致假陰性。同時

由於高速離心機高速旋轉與空氣摩擦會產生大量的熱,因此對於稱能上幾萬轉/分而沒有抽真空的離心機實際轉速本人持懷疑態度。3.試劑

開殼劑和操作問題造成標本dna沒有暴露出來,致使擴增無法進行,這是造成假陰性的又一主要因素。

2樓:郗雲德佼詩

造成pcr假陰性的原因是複雜的,也是多樣的。主要有:

1.pcr儀本身的質量問題。pcr儀設計原理上的差異和經常出現的質量問題(如:溫控不準等)給臨床帶來了諸如非特異性擴增(假陽性)、擴增效率下降(假陰性)等問題.

2.離心機問題。離心機的質量或使用不正確,造成離心標本模板沒有分離出來造成假陰性,竊以為這是最易被忽視的問題。

其時離心機使用問題不僅在pcr,在整個檢驗工作中都是最易被忽視的問題,只是因為在其他工作中不象pcr那樣明顯影響檢測結果罷了。

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