什麼是 電荷效應 濃縮效應 轉移電泳
1樓:網友
電荷效應:帶有效電荷數不同的物質經電泳得到分離。
濃縮效應:樣品物質的有效遷移率介於快、慢離子之間,因而聚集在這個移動介面附近,被濃縮為乙個狹窄的中間層。
我自己歸納了下,大致是這個意思,做不得準確答案的。
2樓:
電泳過程必須在一種支援介質中進行。tiselius等在1937年進行的自由介面電泳沒有固定支援介質,擴散和對流都比較強,影響分離效果。所以出現了固定支援介質的電泳,樣品在固定的介質中進行電泳過程,減少了擴散和對流等干擾作用。
最初的支援介質是濾紙和醋酸纖維素。
膜,目前這些介質在實驗室已經應用得較少。在很長一段時間裡,小分子物質如氨基酸。
多肽、糖等通常用濾紙或纖維素、矽膠薄層平板為介質的電泳進行分離、分析,但目前則一般使用更靈敏的技術如hplc等來進行分析。這些介質適合於分離小分子物質,操作簡單、方便。但對於複雜的生物大分子。
則分離效果較差。凝膠作為支援介質的引入大大促進了電泳技術的發展,使電泳技術成為分析蛋白質、核酸。
等生物大分子的重要手段之一。剛開始使用的凝膠是澱粉凝膠,現在使用得最多的是瓊脂糖凝膠和聚丙烯醯胺凝膠。蛋白質電泳主要使用聚丙烯醯胺凝膠。
以上不為原創。
簡述盤狀電泳的濃縮效應
3樓:網友
不同的膠粒其鉛雀慧表面的組成情況不同。
它們有的能吸附正電荷,有的能吸附負電荷。
因此歲盯有的膠粒帶正電荷,如氫氧化鋁膠體。
有的膠粒帶負電荷,如三硫化二砷(as2s3)膠體等。
如果在膠體中通以直流電,它槐答們或者向陽極遷移,或者向陰極遷移。
分離膠和濃縮膠的區別是什麼
4樓:清歡雪兒
ph值不同,前者主要表現為濃縮效用,後者表現為電荷效用和分子篩效用。
濃縮效應主要在濃縮膠中完成,濃縮膠的,在這個ph條件下,緩衝液中的hcl的cl離子幾乎全部解離,gly的等電點為,僅少數解離為負離子,在電場中移動速度很慢。酸性蛋白質在此ph下解離為負離子,三類離子的遷移速率為cl一般蛋白質gly,電泳開始後,cl離子泳動快,在其後留下乙個低離子濃度區。gly在電場中移動很慢,造成移動離子的缺乏,於是快慢離子間就形成了乙個缺少離子的高壓區,在高壓區內所有的負離子都會加速移動,當移到cl離子區域時,高電壓消失,蛋白質的移動速度慢下來,當以上穩定狀態建立後,蛋白質樣品在快慢離子間被濃縮形成乙個狹小的之間層,並按蛋白質所帶負電荷量的多少依次排列成帶,濃縮樣品,從濃縮膠進入分離膠後,膠的ph公升高,gly的離解度增大,泳動率上公升,又因為它分子小,故超過所有的蛋白質分子,緊跟在cl離子後,cl離子遷移後,低離子濃度不再存在,形成了恆定的電場強度,因此,蛋白質樣品在分離膠中的分離主要取決於它的電荷性質,分子大小和形狀,分離膠的孔徑有一定大小,對不同相對質量的蛋白質來說,通過時收到的滯阻作用不同,即使靜電荷相等的顆粒,也會由於這種分子篩的效應,把不同大小的蛋白質相互分開。
濃縮膠(積沉膠)和分離膠有什麼區別?各自在電泳中的作用是什麼?
5樓:網友
濃縮膠裡完成完全sds化、以及把一些大的離譜的東西去掉。
分離膠就分離。。。
6樓:網友
區別:ph值(忘了那個ph大一點)不同;膠濃度不同,凝膠的孔徑不同。(濃縮膠濃度小,孔徑大)
作用:濃縮膠:就是濃縮作用。有堆積作用,經過大孔徑凝膠的遷移作用而被濃縮至乙個狹窄的區帶,提高電泳的靈敏度。
分離膠:就是分離,把樣品中的不同組分分離開來。
血清蛋白電泳時,為什麼要把上層電泳槽接在負極上
7樓:111尚屬首次
因為你在上邊加樣,dna,rna都帶負電,sds處理後的蛋白也帶負電。
電泳系統的不連續性表現在哪幾個方面?存在哪幾種物理效應?
8樓:凱凱
緩衝液離子成分、ph、凝膠濃度及電位梯度呈不連續性。
電荷效應、分子篩效應、濃縮效應。
由於濃縮膠的堆積作用,可使樣品(即使是稀樣品)在濃縮膠和分離膠的介面上先濃縮成一窄帶,然後在一定濃度(或一定濃度梯度)的凝膠上進行分離。由於不同孔徑凝膠的分子篩作用,使不連續電泳的解像度大大高於連續電泳。
不連續凝膠電泳
9樓:網友
知道搜尋後:不連續聚丙烯醯胺凝膠電泳包含了兩種以上的緩衝液成分、ph值和凝膠孔徑,而且在電泳過程中形成的電位梯度亦不均勻。由此產生的濃縮效應、電荷效應和分子篩效應。
1.濃縮效應 樣品在電泳開始時,通過濃縮膠被濃縮成高濃度的樣品薄層(一般能濃縮幾百倍),然後再被分離。當通電後,在樣品膠和濃縮膠中,解離度最大的cl—有效遷移率最大,被稱為快離子,解離度次之的蛋白質則尾隨其後,解離度最小的甘氨酸離子(pi=6.0)泳動速度最慢,被稱為慢離子。由於快離子的迅速移動,在其後邊形成了低離子濃度區域,即低電導區。
電導與電勢梯度成反比,因而可產生較高的電勢梯度。這種高電勢梯度使蛋白質和慢離子在快離子後面加速移動。因而在高電勢梯度和低電勢梯度之間形成乙個迅速移動的介面,由於樣品中蛋白質的有效遷移率恰好介於快、慢離子之間,所以,也就聚集在這個移動的介面附近,逐漸被濃縮,在到達小孔徑的分離膠時,已形成一薄層。
2.電荷效應 當各種離子進入ph8.9的小孔徑分離膠後,甘氨酸離子的電泳遷移率很快超過蛋白質,高電勢梯度也隨之消失,在均一電勢梯度和ph的分離膠中,由於各種蛋白質的等電點不同,所帶電荷量不同,在電場中所受引力亦不同,經過一定時間電泳,各種蛋白質就以一定順序排列成一條條蛋物納白質區帶。
3.分子篩效應 由於分離膠的孔徑較小,配雹分子量大小或分子形狀不同的蛋白質通過分離膠時,所受阻滯的程度不同,因而;遷移率不同而被分離。此處分子篩效應是指樣品通過一定孔徑的凝膠時,受阻滯的程度不同,小分子走在前面,大分子走在後面,各種蛋白質按分子大小順序排列成相應的區帶。
具體的實驗操作還是需要去實驗室學習一下的,比較常見罩賣沒的是蛋白質的聚丙烯醯胺凝膠圓盤電泳。
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