為什麼在過量溴化乙錠存在時,超螺旋DNA比線狀DNA有較高的密度 20

時間 2025-01-16 01:35:16

為什麼在過量溴化乙錠存在時,超螺旋dna比線狀dna有較高的密度

1樓:網友

一、細菌培養物的生長。

從瓊脂平板上挑取乙個單菌落,接種到培養物中(有含有行當抗生素的液體培養基中生長),然後從中純化質粒,質粒的提純幾乎總是如此。現在使用的許多質粒載體(如puc系列)都能複製到很高的拷貝數,惟致只要將培養物放在標準lb 培養基中生長到對數晚期,就可以大量提純質粒。此時,不必造反性地擴增質粒dna。

然而,較長一代的載體(如pbr322)由於不能如此自由地複製,所以需要在得到部分生長的細菌培養物中加入氯黴素繼續培養若干小時,以便對質粒進行性擴增。氯黴素可抑制宿主的蛋白質合成,結果阻止了細菌染色體的複製,然而,鬆弛型質粒仍可繼續複製,在若干小時內,其拷貝數持續遞增。這樣,像pbr322-類的質粒,從經氯黴素處理和未經處理的培養物中提取質粒的產量迥然不同,前者大為增高。

多年來,加入足以完全抑制蛋白質合成的氯黴素(μg/ml)已成為標準的操作、用該方法提取的質粒dna量,對於分子轉殖中幾乎所有想象到的工作任務。

2樓:網友

因為etbr是插入雙鏈之間的,每個螺旋最多多少個來著。。。在介紹cscl梯度離心的地方會有寫。

為什麼在過量溴化乙錠存在時,超螺旋dna比線狀dna分子具有較高的密度?

3樓:菡墨塵

環形dna分子。

如果具有上節表中b型dna的結構特點,則稱為處於鬆弛狀態的分子。如果環形dna被切斷,形成乙個線性雙螺旋。

分子,然後用兩手分別捏住線性dna分子的兩端,捻動其中的一端或兩端同時向相反的方向捻動,雙螺旋可以形成過旋(overwound,沿右手螺旋方向捻動)或欠旋(underwound,沿右手螺旋相反方向捻動)結構。過旋和欠旋都會給雙螺旋dna分子增加了額外的扭轉張力。

當將線性過旋或欠旋的dna連線成環狀時,為了維持b構象,dna分子會自動形成額外的超螺旋(supercoils)來抵消過旋或欠旋造成的應力。過旋dna會自動形成額外左手螺旋,稱為正超螺旋(positive supercoils);而欠旋形成額外右手螺旋,稱為負超螺旋(negative supercoils)(右圖)。生物體內大多數dna分子都處於負超螺旋結構,而正超螺旋dna在自然界還沒有發現。

負超螺旋也可以通過dna的區域性解旋消除。區域性解旋在dna複製。

和轉錄的起始期間是非常重要的。

回到這個問題,加入溴化乙錠。

後一半會產生正超螺旋,原因可以從三點考慮。

1.溴化乙錠可以插入雙分子之間,減弱鹼基間的作用。

2.螺旋結構一部分有鹼基間的作用產生,而由1知道,作用由於溴化乙錠而減弱了。

3.溴化乙錠的加入,使原來和dna連線的蛋白質不能連線到dna形成nucleosome

具體應該看看dna拓撲學,上面的123使參考**上看的,我也不太明白,你可以自己開啟網頁看看,希望對你有幫助。

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