1樓:北京索萊寶科技****
提取總rna的方法現在主要的就是用商用試劑盒,還有就是用傳統的酚氯仿,trizol提取,一般trizol提取的質量相對比較好,但是操作起來比較麻煩,全程冰上操作,包括離心,這要看你們實驗室有沒有相應的試劑或儀器了,如果用商用試劑盒的話,通常是針對比較特殊的要求的樣本的,比如石蠟樣本,植物樣本等,你需要根據你的樣本型別選擇不同的試劑。
2樓:smile我的愛人
提取總rna的方法現在主要的就是用商用試劑盒,比如凱傑,歐米伽等廠家,還有就是用傳統的酚氯仿,trizol提取,一般trizol提取的質量相對比較好,但是操作起來比較麻煩,全程冰上操作,包括離心,這要看你們實驗室有沒有相應的試劑或儀器了,如果用商用試劑盒的話,通常是針對比較特殊的要求的樣本的,比如石蠟樣本,植物樣本等,你需要根據你的樣本型別選擇不同的試劑,你可以諮詢一下凱傑生物的技術支援。
微量樣本總rna提取試劑盒怎麼樣
3樓:神奇的藥智網
本試劑盒採用高效、專一結合核酸的離心吸附柱和獨特的緩衝系統,可從多種不同型別的微量樣品中快速提取總rna.本試劑盒特別加入了carrier,可以從體系中輕鬆捕獲微量核酸,具有方便快捷、產量高、重複性好的特點。30-40分鐘內即可完成反應,提取的總rna純度極高,沒有dna和蛋白質汙染,可用於rt-pcr、northern blot、dot blot、polya 篩選、體外翻譯、rnase保護分析和分子克隆,有什麼不明白的,可以查詢藥智網,回答滿意請您採納,謝謝。
求助qiagen試劑盒提取總rna的步驟
4樓:南京金益柏生物科技****
植物材料 用最精確的方法,稱取不超過100mg的植物材料,置於處理過的研缽,加入液氮進行研磨 將研磨得到的粉末,快速轉移至無rnase,並經過液氮冷卻的2ml離心管(自備),注意材料要保持冷凍狀態 加入450µl buffer rlt(1ml 加入10μl β-巰基乙醇),顛倒混勻,渦旋 將溶解物轉移至於淡紫色的qiashredder spin column,最大轉速離心2分鐘,取上清轉移至新的2ml的收集管(自備) 加倍體積(約225μl)的無水乙醇,迅速吹打混勻 將樣品(約650μl )轉移至帶有2ml**管的粉色rneasy spin column(以下簡稱column),>8000g離心15s,將濾出物丟棄 加入700µl buffer rw1至column,>=8000g離心15s清洗柱子上的濾膜,丟棄濾出物和收集管 轉移column至新的收集管(提供),加入500 µl buffer rpe,>=8000g離心15s清洗柱子上的濾膜,丟棄濾出物 再加入500µl buffer rpe,>=8000g離心2分鐘清洗柱子上的濾膜 (為了保證除淨buffer rpe,可棄舊的收集管和濾出物,取新收集管(自備) 最大轉速離心1分鐘) 轉移rneasy spin column至收集管(提供),加入30-50µl 無rna酶的水於濾膜上,>=8000g離心1分鐘,洗脫rna (如果預期得到的rna大於20µg,可重複第十步) 或者看說明書最好了。
5樓:北京索萊寶科技****
總rna提取試劑盒步驟:
樣品處理:a. 植物組織:取新鮮或-70℃凍存100mg組織在液氮中研磨,把粉末加入到1ml裂解液中混勻。
b. 動物組織:取新鮮或-70℃凍存100mg組織加1ml裂解液,用組織研磨杵或勻漿器勻漿處理。
c. 貼壁細胞:直接在培養板中加入裂解液裂解細胞,每106細胞加1ml 裂解液。用取樣器吹打混勻。
d. 細胞懸液:離心收集細胞。每106動物、植物和酵母細胞或每107細菌細胞加1ml裂解液混勻。
e. 血液處理:取0.
2-1ml新鮮血液加3倍體積紅細胞裂解液,混勻後室溫放置10分鐘,10000rpm離心1分鐘。棄上清,若沉澱含有紅細胞,可加入2倍體積紅細胞裂解液重複裂解步驟。離心後沉澱加入1 ml裂解液混勻。
將處理後的樣品在室溫放置5分鐘,使得核酸蛋白複合物完全分離。
向勻漿樣品中加氯仿,蓋好管蓋,劇烈振盪15秒,室溫放置3-5分鐘。
2-8℃ 12000 rpm離心10分鐘。rna主要在上層無色的水相中,把水相轉移到新管中,不要吸到沉澱。
吸附柱前處理:在吸附柱中加入500ul 洗柱液,室溫放置2分鐘,2-8℃ 12,000 rpm離心2min,棄廢液。
第4步收集的上清中加入200ul無水乙醇混勻,加入吸附柱靜置2分鐘,2-8℃ 12000rpm離心2min,棄廢液。
向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),2-8℃ 12,000 rpm離心2min,棄廢液。
向吸附柱中加入600ul漂洗液,2-8℃ 12,000 rpm離心2min,棄廢液。
12000rpm離心2min,棄掉收集管,將吸附柱置於室溫放置數分鐘將吸附柱中殘餘的漂洗液去除。
將吸附柱放入新管中,向膜**滴加50-100ul rnase free ddh2o,室溫放置5min,12000rpm室溫離心2min即得到rna。
rna提取,用哪個試劑盒較好
6樓:匿名使用者
提取總rna的方法現在主要的就是用商用試劑盒,比如凱傑,歐米伽等廠家,還有就是用傳統的酚氯仿,trizol提取,一般trizol提取的質量相對比較好,但是操作起來比較麻煩,全程冰上操作,包括離心,這要看你們實驗室有沒有相應的試劑或儀器了,如果用商用試劑盒的話,通常是針對比較特殊的要求的樣本的,比如石蠟樣本,植物樣本等,你需要根據你的樣本型別選擇不同的試劑,你可以諮詢一下凱傑生物的技術支援。
7樓:北京索萊寶科技****
提取總rna的方法現在主要的就是用商用試劑盒,還有就是用傳統的酚氯仿,trizol提取,一般trizol提取的質量相對比較好,但是操作起來比較麻煩,全程冰上操作,包括離心,這要看你們實驗室有沒有相應的試劑或儀器了,如果用商用試劑盒的話,通常是針對比較特殊的要求的樣本的,比如石蠟樣本,植物樣本等,你需要根據你的樣本型別選擇不同的試劑。
trizol裂解細胞後可以按照rna提取試劑盒提取嗎
8樓:名傑**
總rna提取試劑盒(trizol法)
ripure試劑是直接從細胞或組織中提取總rna的試劑。它在破碎和溶解細胞時能保持rna的完整性。加入氯仿後離心,樣品分成水樣層和有機層。
rna存在於水樣層中。收集上面的的水樣層後,rna可以通過異丙醇沉澱來還原。在除去水樣層後,樣品中的dna和蛋白也能相繼以沉澱的方式還原。
乙醇沉澱能析出中間層的dna,在有機層中加入異丙醇能沉澱出蛋白。共純化dna對於樣品間標準化rna的產量十分有用。
無論是人、動物、植物還是細菌組織,該方法對少量的組織(50-100mg)和細胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細胞(>107)均有較好的分離效果。tripure試劑操作上的簡單性允許同時處理多個的樣品。所有的操作可以在一小時內完成。
tripure抽提的總rna能夠避免dna和蛋白的汙染。故而能夠作rna印跡分析、斑點雜交、poly(a)+選擇、體外翻譯、rna酶保護分析和分子克隆。如果是用於pcr,當兩條引物位於單一外顯子內時,建議用擴增級的dnase i來處理抽提的總rna。
tripure試劑能促進不同種屬不同分子量大小的多種rna的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的rna瓊脂糖凝膠電泳並用溴化乙啶染色,可見許多介於7 kb和15 kb之間不連續的高分子量條帶(mrna和hnrna成分),兩條優勢核糖體~5 kb (28s)和~2 kb(18s),低分子量rna介於和0.
3 kb之間 (trna, 5s)。當抽提的rna用te稀釋時其a260/a280比值≥。
適用範圍:適用於各種動植物組織/細胞總rna、dna、蛋白的快速抽提用杭州昊鑫生物的。
9樓:匿名使用者
先加rna抑制劑,然後冰上提取,操作儘量快。
這個公司,武漢勤致傑生物,我用了。根本提不出來,全降解了,付錢之前騙人說多好用,售後的時候態度超級差,毀我樣本,給我氣收。
誰有omega rna提取試劑盒中文說明
求助qiagen試劑盒提取總rna的步驟??
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