學生在進行革蘭氏染色時,出錯的主要原因有哪些

時間 2022-05-15 17:20:11

1樓:侍芹

學生在進行格蘭仕染色的時候出錯的主要原因第一個就是染色的時間太短,第二個就是拖車的時間太長,這樣的話就可以使染色不均勻。

造成革蘭氏染色結果不正確(假陰性或假陽性)的主要原因有哪些? 10

2樓:淡定哥啦

因為細菌的細胞壁結構不同,g﹢菌:細胞壁厚,肽聚糖網狀分子形成一種透性障,當乙醇脫色時,肽聚糖脫水而孔障縮小,故保留結晶紫-碘複合物在細胞膜上。呈紫色。

gˉ菌:肽聚糖層薄,交聯鬆散,乙醇脫色不能使其結構收縮,其脂含量高,乙醇將脂溶解,縫隙加大,結晶紫-碘複合物溶出細胞壁,沙黃復染後呈紅色。 革蘭氏陽性菌細胞壁厚約20-80nm,有15-50層肽聚糖片層,含20-40%的磷壁酸。

革蘭氏陰性菌細胞壁厚約10nm,僅2-3層肽聚糖,另外還有脂多糖、細菌外膜和脂蛋白。革蘭氏染色結果出現假陰性與假陽性的原因:1、脫色是革蘭氏染色是否成功的關鍵,脫色不夠造成假陽性,脫色過度造成假陰性;2、老齡的革蘭氏陽性細菌會被染成紅色而造成假陰性,故應選用活躍生長期菌種染色;3、塗片過厚,脫色不完全造成假陽性。

3樓:專注鍊金30年

雜菌過多就會影響結果

1.影響革蘭氏染色的因素有哪些?如何避免出現假陽性和假陰性的結果?

4樓:mono教育

革蘭氏染色是用來鑑辨細菌的一種方法,細菌細胞壁上的主要成份不同,利用這種染色法,可將細菌分成兩大類。這種染色法是由一位丹麥醫生漢斯。

在實驗中經常會出現假陽性和假陰性的結果,假陽性主要是由於脫色不完全,可能是由於塗片過厚,或者是結晶紫染色過度,導致脫色不完全。細胞培養時間太長,可能已經有部分細胞發生死亡或者自溶,也導致細胞壁通透性的改變而出現假陰性結果。

5樓:匿名使用者

1.菌齡要合適,老齡化細菌易產生假陰性2.酒精脫色時間要合適,脫色時間過長易造成假陰性,脫色時間過短易造成假陽性。

6樓:匿名使用者

影響染色的原因很多,染色的任何一個步驟都會有影響,如:細菌是否塗布均勻,染料是否過期,染色的時間是否夠等等。

革蘭氏染色需要注意哪些問題 為什麼

7樓:老藝術家

革蘭氏染色需要注意哪些問題:1.選用活躍生長期菌種染色,老齡的革蘭氏陽性細菌會被染成紅色而造成假陰性。

2.塗片

不宜過厚,以免脫色不完全造成假陽性。

3.脫色是革蘭氏染色是否成功的關鍵,脫色不夠造成假陽性,脫色過度造成假陰性。

原理:

通過結晶紫初染和碘液媒染後,在細胞壁內形成了不溶於水的結晶紫與碘的複合物,革蘭氏陽性菌由於其細胞壁較厚、肽聚糖網層次較多且交聯緻密,故遇乙醇或丙酮脫色處理時,因失水反而使網孔縮小,再加上它不含類脂,故乙醇處理不會出現縫隙。

因此能把結晶紫與碘複合物牢牢留在壁內,使其仍呈紫色;而革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯度差,在遇脫色劑後,以類脂為主的外膜迅速溶解,薄而鬆散的肽聚糖網不能阻擋結晶紫與碘複合物的溶出,因此通過乙醇脫色後仍呈無色,再經沙黃等紅色染料復染,就使革蘭氏陰性菌呈紅色。

8樓:小王閒談娛樂

選用活躍生長期菌種染色,老齡的革蘭氏陽性細菌會被染成紅色而造成假陰性。塗片不宜太過厚,以免脫色不完全造成假陽性。脫色是革蘭氏染色是否成功的關鍵,脫色不夠造成假陽性,脫色過度造成假陰性。

通過結晶紫初染和碘液媒染後,在細胞壁內形成了不溶於水的結晶紫與碘的複合物,革蘭氏陽性菌由於其細胞壁較厚、肽聚糖網層次較多且交聯緻密,故遇乙醇或丙酮脫色處理時,因失水反而使網孔縮小,再加上它不含類脂,故乙醇處理不會出現縫隙。

革蘭氏染色注意事項

在整個革蘭氏染色過程中,在保證試劑有效的前提下,需要嚴格控制的幾個方面:染色菌必須是在其活躍期內,塗布狀態不可太厚,媒染時間嚴格控制在50s-60s之間,脫色時間嚴格控制在20s-30s。

以典型的革蘭氏陰性菌大腸埃希氏菌為例,有人做過統計,媒染時間嚴格控制在40s-60s之內,染色結果準確率基本可達到100%,而超過60s準確率會有一定的降低,若媒染超過100s,準確率甚至可降低接近20%左右。因此在媒染過程中一定要注意媒染時間,控制在50-60s為宜。

9樓:景田不是百歲山

1、革蘭氏染色成敗的關鍵是酒精脫色。如脫色過度,革蘭氏陽性菌也可被脫色而染成陰性菌;如脫色時間過短,革蘭氏陰性菌也會被染成革蘭氏陽性菌。脫色時間的長短還受塗片厚薄及乙醇用量多少等因素的影響,難以嚴格規定。

2、染色過程中勿使染色液乾涸。用水沖洗後,應吸去玻片上的殘水,以免染色液被稀釋而影響染色效果。

3、選用幼齡的細菌。g+菌培養12h-16h,e.coli培養24h。若菌齡太老,由於菌體死亡或自溶常使革蘭氏陽性菌轉呈陰性反應。

10樓:小仙鸛七號

注意安排g+ g- 對照 過火時候不要太久 孔雀綠不要烤糊了

11樓:匿名使用者

在實驗中需要注意,經常會出現假陽性和假陰性的結果,假陽性主要是由於脫色不完全,可能是由於塗片過厚,或者是結晶紫染色過度,導致脫色不完全。假陰性可能是因為細胞固定過度,造成細胞壁通透性的改變,而出現假陰性結果;另外,細胞培養時間太長,可能已經有部分細胞發生死亡或者自溶,也導致細胞壁通透性的改變而出現假陰性結果。

12樓:卓美落飛

需要注意顏色和脫色時間

13樓:匿名使用者

需注意操作前選用活躍生長期(18-24h的菌落)菌種染色,培養時間過久的的陽性菌,可能會因為細胞死亡或自溶導致細胞壁通透性改變而被染成紅色造成假陰性。

①塗菌前將塗菌部位在火焰上烤一下用於除去油脂,再挑取適量的菌,不宜過多,均勻塗開不宜過厚,以免脫色不完全造成假陽性。

②固定時玻片過火時間不能太久,來回2-3次③染色過程中勿使染色液乾涸。

④脫色是革蘭氏染色是否成功的關鍵,20-30s為宜,脫色不夠造成假陽性,脫色過度造成假陰性。

⑤用水沖洗後,應吸去玻片上的殘水,以免染色液被稀釋而影響染色效果。

用青蟲菌做革蘭氏染色的原因

14樓:匿名使用者

青蟲菌屬好氣性細菌,其殺蟲作用與殺螟桿菌、蘇雲金桿菌都較相似。但青蟲菌的伴孢晶體比殺瞑桿菌小,對不同害蟲的毒性也稍有差異。產品為灰白色或淡黃色粉末,殺蟲速度較慢,菜青蟲取食後,需隔1天才能死亡,殘效期7-10天。

對人、畜、作物、蜜蜂安全,好氣性細菌

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