3 磷酸甘油醛脫氫酶的介紹

時間 2021-09-06 11:54:44

1樓:匿名使用者

3一磷酸甘油醛脫氫酶(glyceraldehyde一3-phosphate dehydrogenase,gapd)的系統名為d一甘油醛一3一磷酸:輔酶i氧化還原酶(具磷酸化作用)[o-gly-ceral-dehyde一3-phosphate nad+oxidoreductase(phosphorylat—ing)]。它催化3一磷酸甘油醛氧化(脫氫)和磷酸化,生成1,3一二磷酸甘油酸,是糖代謝的中心環節,、故對糖代謝起著重要的作用。

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內容來自使用者:上海索橋生物****

貨號:qs2205-50規格:50管/48樣

3-磷酸甘油醛脫氫酶

(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,gapdh)試劑盒說明書

分光光度法

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做**定

測定意義:

gapdh催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸,是糖酵解途徑的關鍵酶,與糖異生途徑、體內血糖濃度的維持和糖尿病的發生密切相關,在機體糖、脂、蛋白代謝紊亂疾病中發揮重要作用。

測定原理:

3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和atp生成1,3二磷酸甘油酸。gapdh逆向催化1,3二磷酸甘油酸和nadh生成3磷酸甘油醛、無機磷和nad,340nm處測定nadh的減少量可反映gadph活性的高低。

自備實驗用品及儀器:

分光光度計、恆溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 ml石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配製:

提取液:60ml×1瓶,4℃儲存;

試劑一:粉劑×1瓶,-20℃儲存;

試劑二:液體50ml×1瓶,4℃儲存;

試劑三:液體×1支,4℃儲存;

樣本的前處理:

1、細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心後棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:

1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200w,超聲3s,間隔10s,重複30次);(