1樓:戈映寒
空調時的時間調,但是他模糊的原因主要是一下,就好像是國教師的事業個小時的條帶保護的話,主要是因為口腔的,高腔的今天都不搞,今天都不搞掉,只要重新做個實驗重新做個實驗就可以了。
pcr條帶模糊是什麼原因
2樓:網友
有很多原因。如果目的條帶比較單一且沒有雜帶,說明迴圈數偏低,可以適當增加迴圈數;如果雜帶多,目的條帶看不清或者很弱,說明整個擴增體系或反應程式有問題,需要優化pcr體系和程式。
western blot實驗電泳時 marker條帶不清晰,很彌散,無法辨別有幾條帶,請問什麼原因可以導致啊?
3樓:佚名之貓
如果只是marker不清晰,就是markr沒煮好,或者降解了。重新換乙個新marker,嚴格按配方煮。
如果所有條帶都這樣那就是膠的問題。
膠的前沿跑的齊嗎?速度如何?如果跑的時候就不正常那也可能是電泳緩衝液配錯了。
4樓:網友
我覺得主要是膠和電泳緩衝液的問題,tris 濃度,ph是否正確。sds的純度可能也有關係。丙烯醯胺的濃度,交聯度合適不合適。
做膠的時候各種溶液是否加的正確,膠的濃度是否合適,電泳緩衝液的濃度,ph有無問題。
marker是不是時間太長了。
5樓:阿挺的菜菜
marker上樣量太少。
國產marker得上到5ul以上。
進口的3ul以上。
pcr條帶模糊。這是神馬情況?
6樓:網友
marker左邊那條模糊的條帶是我拿乙個細菌做的rapd pcr,為什麼會這麼模糊呢建議做乙個正對照,一起pcr跑電泳!
7樓:網友
1. 膠沒有完全融化、沒有完全冷卻。
2. 非特異性擴增;
調整方法:1.配好膠,完全融化,不燙手時制膠,完全冷卻後拿出梳子,跑電泳;
2. 優化pcr:模板濃度、mg2+濃度,酶的用量,退火溫度增高等;
3. 重新設計引物,提高引物特異性。可先在ncbi**blast看看引物是不是特異性很強;
希望有幫助。祝好運!
western目的條帶模糊,內參不錯,求助
8樓:新華電腦學院
做了3個月的western,做不出目的條帶,內參清晰,請教] 老師:這是我做的步驟,請看有哪些要調整的,急啊,盼老師指導!配試劑:
電泳緩衝液5*0 125mtris 15 1g1 25mglycine 94g0 5%sds 5 0g去離子水 定容至1l溼轉緩衝液10*tris 30gglycine 154g去離子水 定容至1l使用時,溼轉緩衝液1* 1l(100ml 10*溼轉液+700ml去離子水+200ml 甲醇)。(一) 灌膠與電泳1 將清洗處理幹。
pcr擴增的時候,條帶出現模糊該如何調整?
9樓:網友
可能原因 :1、引物特異性差;2、模板dna不純;3、mg離子濃度過高;4、dntp濃度過高;5、退火溫度過低;6、迴圈數過多。
western的背景和條帶模糊怎麼回事
10樓:網友
封閉沒有做好,抗體有比較嚴重的非特異性吸附。解決:用5%的無糖低脂的奶粉做封閉,效果比bsa的還好還便宜。
時間要摸索下。 環境光源汙染。解決:
乙個好的暗室。 試劑問題。配置新鮮的試劑。
pcr電泳結果特別不清晰,條帶很模糊 連marker也看不清上樣孔很亮,不加任何東西的上樣孔都很亮
11樓:嘮叨的人
marker都出問題估計是跑膠環節出了問題,但你們工作都這麼認真,怎麼會出錯呢?基本上是試劑或樣品的 問題吧,換換東西再做做看吧,加油!
12樓:化晴子
你的電泳緩衝液和制膠緩衝液濃度不準或者髒了吧?換新的電泳緩衝液和制膠緩衝液試試。
marker都出問題說明是你的膠的問題,或者電泳操作的問題。
13樓:網友
跑久了eb就會聚集到點樣孔那邊去,條帶就會變暗,但是模糊的話,可能是膠有質量問題。
你可以把電泳時間縮短試試,或者跑一會就照一下看看,是不是eb的原因。
14樓:很短暫的停留
這還用說麼。
garose gel 重配。
用了一年了你們也不換。
你們是做日常練習啊。
還是做實驗啊。
電泳液重換!長時間使用離子濃度太大影響電泳結果縮短電泳時間 時間過長條帶會跑出凝膠 無法看到p出的條帶條帶不清晰說明你們的primer不純或者primer效果差,換primer
最後就是儀器的問題。
檢查儀器功能是否正常,質控很重要啊。
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